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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
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王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题？

请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？
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心晴
1楼 2011-10-20 09:58:01
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 09:58:01:
请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？

转化是一个连续的过程 其中一步做不好就会影响转化效率；至于热激  我们以前统统42度 90s 转化效率基本上可以随心所欲了  前提是感受态不能太差；可以通过复苏时间 以及涂板的菌液量  以及复苏培养基的量 来控制转化效率
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15楼2011-10-21 09:05:31
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S，复苏的话选择37℃，不超过200rpm，作个参考
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2楼2011-10-20 10:23:20
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
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3楼2011-10-20 10:24:39
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王玉民

新虫 (小有名气)
西瓜: 买的是公司的感受态的话，以说明书为准吧，这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题，不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。
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心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
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