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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
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王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题？

请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？
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心晴
1楼 2011-10-20 09:58:01
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peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-24 10:24:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 10:27:29:
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。

我还没有用过你说的那个，一般用TaKaRa与promega的，也看过别的，就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗？热激的温度是42度，用水浴
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7楼2011-10-20 10:37:17
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S，复苏的话选择37℃，不超过200rpm，作个参考
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2楼2011-10-20 10:23:20
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
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3楼2011-10-20 10:24:39
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王玉民

新虫 (小有名气)
西瓜: 买的是公司的感受态的话，以说明书为准吧，这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题，不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。
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心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
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