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王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题?

请问大家,连接之后转化时,热击的时间使30s好还是90s好?复苏时摇床的转速和时间多少最合适?
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心晴
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peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-24 10:24:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 10:27:29:
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点,用90s150rpm的却怎么都长不出来。

我还没有用过你说的那个,一般用TaKaRa与promega的,也看过别的,就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗?热激的温度是42度,用水浴
7楼2011-10-20 10:37:17
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S,复苏的话选择37℃,不超过200rpm,作个参考
2楼2011-10-20 10:23:20
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
3楼2011-10-20 10:24:39
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王玉民

新虫 (小有名气)

西瓜: 买的是公司的感受态的话,以说明书为准吧,这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题,不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点,用90s150rpm的却怎么都长不出来。
心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
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