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爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 转化后培养基上的单菌落怎么那么少，还有卫星菌落已有6人参与

转化后，在有氨苄青霉素的LB培养基上培养，一个板上只有几个菌落，还有一部分是卫星菌落，有的说是放在培养箱里久了就长成了卫星菌落，可有的说放再久也不会长成卫星菌落，如果是卫星菌落说是可能是污染的。一个板上不怎么也应该有300个单菌落吗？我的怎么只有几个。PCR后发现是我要的1600pb，但我怕是污染的。是不是链接的问题，时间短，效率低，只连接上了一小部分才出现这种情况啊。

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1楼 2015-06-09 22:07:23

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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既然已经成功得到阳性转化菌，为什么还要再做？

氨苄青霉素的抗性基因编码一个酶，被阳性转化菌分泌到胞外将菌所在地方的氨苄青霉素的酰胺环切开，培养的时间越久，酶扩散的范围越大，平板上的氨苄青霉素被破坏得就越多。氨苄青霉素抑制了阴性转化菌的生长，久了之后自然就会有阴性菌在阳性菌的周围长，形成卫星菌落了。

没必要担心

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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

9楼2015-06-11 03:31:41