| 查看: 5443 | 回复: 6 | |||
[求助]
有关含氨苄青霉素的固体培养基上大肠杆菌培养的问题 已有2人参与
|
|
这几天在做质粒提取的实验，把含有氨苄青霉素抗性的质粒(我们一共转了四种不同的质粒，但每种质粒上都含有抗氨苄基因)转入大肠杆菌感受态细胞后，将该细胞涂布于含有氨苄青霉素的固体培养基上培养（约在第一天下午3点左右完成），第二天早上7点左右观察，只有进行GFP-actin转染的细菌在培养基上长出来了，其他培养基上均无菌落长出。之后在中午12点左右观察发现其他培养上有很小很小的菌落长出，更悲剧的是连对照组（将未转染过的感受态细胞涂布于含氨苄的培养基上）也长出了细菌。 这种情况，想请问一下各位： 1：后来才长出的那些菌落是否是杂菌呢，而不是我们想要的转染入质粒的细菌。 2：如果是杂菌生长，为何会产生这种现象呢？（网上有看到说可能是培养基中抗生素失效的原因） 3：将菌落挑入含氨苄的LB培养基后，是否一定需要振荡培养。  谢谢了 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细菌培养 |
» 猜你喜欢
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有23人回复
-
估计是周四
已经有3人回复
-
基金啊基金
已经有3人回复
-
科研孤儿太难了
已经有15人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有10人回复
-
言之凿凿，明天官网会通知放榜？
已经有17人回复
-
时间戳又变了
已经有17人回复
-
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有11人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有23人回复
-
放榜前的不淡定
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 液体培养基污染
已经有17人回复
- 大肠杆菌用普通的营养琼脂培养基能培养出来么？
已经有7人回复
- 连接转化后长出抗性菌落后的LB培养基能保存多长时间
已经有5人回复
- 重组大肠杆菌发酵培养基
已经有5人回复
- 用液体培养基把大肠杆菌摇出来了，但是接种到平板上怎么就一点不长呢
已经有11人回复
- 固体琼脂培养基上面有比10的5次方还多的大肠杆菌怎么计数，
已经有5人回复
- 大肠杆菌利用合成培养基的问题
已经有6人回复
- 转化大肠杆菌平板出现卫星菌落是怎么回事？
已经有12人回复
- 伊红美蓝培养基长出粉红的菌落，是不是大肠杆菌啊？
已经有3人回复
- 求助 PMD 18T载体克隆转化详细不住
已经有9人回复
- 有无大肠杆菌的无色培养基？
已经有16人回复
- 氨苄平板
已经有14人回复
- neomycin/kanamycin resistance gene，这个究竟是指新霉素抗性还是卡那霉素抗性？
已经有11人回复
- 如何把质粒转入大肠杆菌中？
已经有13人回复
- M9培养基养大肠杆菌不加Ca、Mg可以吗
已经有4人回复
- SOB培养基与LB培养基做大肠杆菌感受态哪个更好
已经有7人回复
- LB培养基121℃重复灭菌两次，有影响吗？
已经有8人回复
- 乳酸菌感受态细胞的制备
已经有6人回复
- 大肠杆菌的单菌落，需要什么培养基
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌培养的
已经有11人回复
- 【求助/交流】关于酵母菌与大肠杆菌
已经有6人回复
- 【分享】LB平板；SOB；SOC培养基的制备方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】请教关于大肠杆菌lamda RED重组问题
已经有23人回复
- 真诚请教关于“LB培养基应该用哪种青霉素”
已经有7人回复
Fleaves
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 18980.6
- 散金: 526
- 红花: 42
- 帖子: 2644
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1473397
- 注册: 2011-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
2楼2013-08-18 17:34:30
小小亚杰
木虫 (正式写手)
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 3175.9
- 散金: 1032
- 红花: 4
- 帖子: 542
- 在线: 57.3小时
- 虫号: 1485167
- 注册: 2011-11-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2013-08-19 00:32:58
Sthunder
木虫 (正式写手)
- 应助: 130 (高中生)
- 金币: 2337.8
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 308
- 在线: 176.6小时
- 虫号: 2551016
- 注册: 2013-07-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-08-19 19:50:33
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-08-19 19:50:33
|
1：后来才长出的那些菌落是否是杂菌呢，而不是我们想要的转染入质粒的细菌。 2：如果是杂菌生长，为何会产生这种现象呢？（网上有看到说可能是培养基中抗生素失效的原因） 根据你的对照看，后来的菌是来自你感受态的菌，也就是说有两种可能，a 感受态感染了抗Amp的菌，b，你的Amp失效或者使用浓度过低。此外，楼上说说的卫星菌落是指你有阳性菌落，由于时间过长，菌落周围抗生素被分解而导致原被抑制的感受态细胞复活的现象，而你的菌很明显不是这样。建议新鲜配置Amp or提高你的Amp浓度，重新制备感受态，重新转化！ 3：将菌落挑入含氨苄的LB培养基后，是否一定需要振荡培养。 菌体在液体培养基中是需要振荡培养的哈，否则会长得非常慢！！ Good luck！ |
4楼2013-08-19 07:08:41
zhangbighui
金虫 (正式写手)
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1468.9
- 红花: 4
- 帖子: 322
- 在线: 49.9小时
- 虫号: 2564731
- 注册: 2013-07-25
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
5楼2013-08-19 09:33:00
夏夜微风
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1630.5
- 散金: 409
- 红花: 4
- 沙发: 7
- 帖子: 730
- 在线: 123小时
- 虫号: 2703859
- 注册: 2013-10-07
- 专业: 微生物遗传育种学
6楼2014-09-06 08:34:15
Sthunder
木虫 (正式写手)
- 应助: 130 (高中生)
- 金币: 2337.8
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 308
- 在线: 176.6小时
- 虫号: 2551016
- 注册: 2013-07-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2014-09-06 20:55:10
40