24小时热门版块排行榜    

查看: 4847  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

橄榄树在飘

银虫 (正式写手)

[求助] 有关含氨苄青霉素的固体培养基上大肠杆菌培养的问题 已有2人参与

这几天在做质粒提取的实验,把含有氨苄青霉素抗性的质粒(我们一共转了四种不同的质粒,但每种质粒上都含有抗氨苄基因)转入大肠杆菌感受态细胞后,将该细胞涂布于含有氨苄青霉素的固体培养基上培养(约在第一天下午3点左右完成),第二天早上7点左右观察,只有进行GFP-actin转染的细菌在培养基上长出来了,其他培养基上均无菌落长出。之后在中午12点左右观察发现其他培养上有很小很小的菌落长出,更悲剧的是连对照组(将未转染过的感受态细胞涂布于含氨苄的培养基上)也长出了细菌。
  这种情况,想请问一下各位:
  1:后来才长出的那些菌落是否是杂菌呢,而不是我们想要的转染入质粒的细菌。
  2:如果是杂菌生长,为何会产生这种现象呢?(网上有看到说可能是培养基中抗生素失效的原因)
  3:将菌落挑入含氨苄的LB培养基后,是否一定需要振荡培养。
     谢谢了
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

细菌培养

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
后面长出来的菌落是卫星菌落,没有抗性的,也就是说你很可能没有转化成功
2楼2013-08-18 17:34:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 橄榄树在飘 的主题更新
信息提示
请填处理意见