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chichi1988铜虫 (小有名气)
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【分享】LB平板；SOB；SOC培养基的制备方法 已有10人参与
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附录 常用培养基及缓冲液的制备 1. 培养基 (1) LB平板制备 ① LB培养基的制备（100ml），应在90ml去离子水中溶解： 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g 用5M NaOH调pH值至7.0，加去离子水至100ml。 ② 制备含氨苄青霉素（Amp）的LB平板 在上述100ml的LB培养基中加入1.5g琼脂粉，121℃灭菌20min。待培养基冷却至55℃左右，加入50mg/ml Amp至终浓度50ug/ml，立即将培养基倒入培养皿中（25ml/平板），冷却凝固。 ③ 含Amp、X-Gal、IPTG的LB平板 ④ 在含Amp的平板中加入4μl IPTG(200mg/ml)和40μlX-Gal(20mg/ml)，用无菌的涂布棒把溶液涂布于整个平板，静置直至溶液消失。 (2) SOC培养基的制备 ① 制备20mlSOC培养基，应在15ml去离子水中溶解： 胰蛋白胨 0.4g 酵母提取物 0.1g NaCl 0.05g 250mM KCl 0.2ml ② 用5M NaOH调pH值至7.0，加去离子水至20ml，121℃灭菌20min。 ③ 待上述溶液冷却至室温，加入2M MgCl2（20.3g MgCl2?6H2O加H2O至50ml，121℃灭菌20min）和2M葡萄糖（3.96g葡萄糖，加H2O至10ml，0.22μm滤膜过滤除菌，1ml分装保存）各0.2ml，至终浓度分别为20mM。 |
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