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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】LB平板；SOB；SOC培养基的制备方法
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chichi1988

铜虫 (小有名气)

[交流] 【分享】LB平板；SOB；SOC培养基的制备方法 已有10人参与

附录 常用培养基及缓冲液的制备
1.        培养基
(1)        LB平板制备
①        LB培养基的制备（100ml），应在90ml去离子水中溶解：
胰蛋白胨          1g
酵母提取物       0.5g
NaCl              1g
用5M NaOH调pH值至7.0，加去离子水至100ml。
②        制备含氨苄青霉素（Amp）的LB平板
在上述100ml的LB培养基中加入1.5g琼脂粉，121℃灭菌20min。待培养基冷却至55℃左右，加入50mg/ml Amp至终浓度50ug/ml，立即将培养基倒入培养皿中（25ml/平板），冷却凝固。
③        含Amp、X-Gal、IPTG的LB平板
④        在含Amp的平板中加入4μl IPTG(200mg/ml)和40μlX-Gal(20mg/ml)，用无菌的涂布棒把溶液涂布于整个平板，静置直至溶液消失。
(2)        SOC培养基的制备
①        制备20mlSOC培养基，应在15ml去离子水中溶解：
胰蛋白胨          0.4g
酵母提取物        0.1g
NaCl              0.05g
250mM KCl        0.2ml
②        用5M NaOH调pH值至7.0，加去离子水至20ml，121℃灭菌20min。
③        待上述溶液冷却至室温，加入2M MgCl2（20.3g MgCl2?6H2O加H2O至50ml，121℃灭菌20min）和2M葡萄糖（3.96g葡萄糖，加H2O至10ml，0.22μm滤膜过滤除菌，1ml分装保存）各0.2ml，至终浓度分别为20mM。
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1楼 2010-12-07 10:10:54
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

首先鼓励发帖，
但是，
这些最基础的，
就不用单独发主题了吧
赞一下(1人) 回复此楼
千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
2楼2010-12-07 14:28:30
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chichi1988

铜虫 (小有名气)
多谢斑竹提醒，呵呵新手上路，不太懂！
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3楼2010-12-08 09:18:02
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飞在天堂

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
在我们LB平板制作过程中，要将平板放存在4℃下，这是为什么？不会是抑制细菌的增长吧？
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4楼2011-06-23 15:37:45
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 飞在天堂 at 2011-06-23 15:37:45:
在我们LB平板制作过程中，要将平板放存在4℃下，这是为什么？不会是抑制细菌的增长吧？

低温下，可以抑制细菌增长，也可以减少水分挥发，培养基成分也能保存得更久。如果加了抗生素，那就更是如此，以氨苄青霉素为例，室温下放一天就几乎没效果了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-06-23 15:47:33
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yangweiping

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
基础的东西对新手来说真的很需要。谢谢楼主！
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-10 17:07:38
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smallapple66

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对我还是挺有帮助的，我也是新手
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好好加油
7楼2012-10-10 09:40:07
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匿名

用户注销 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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8楼2013-05-16 20:55:09
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running113

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议有个分子生物学的基础版。
赞一下 回复此楼
SCI我来了！！！
9楼2013-05-16 22:21:54
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2010303542

新虫 (初入文坛)
谢谢楼主，有帮助
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10楼2013-07-01 17:12:00
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