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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于大肠杆菌培养的
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于大肠杆菌培养的 已有6人参与

请问各位，含有质粒的大肠杆菌在氨苄青霉素的平板上生长，一般多长时间可以挑取单克隆，我师兄说如果12小时后长的菌落不够大，就不要再培养了，要重新划板，可是我的一般都是15小时以后才长的足够大，挑取单克隆才能生长，今天中午挑了一个长了14个小时的单克隆，在液体培养基里根本就没长出来。
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1楼 2011-03-29 21:20:02
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-03-29 22:57:30
培养16小时都没有关系的，呵呵。虽然有时候会长一点卫星菌落，但是卫星菌落很小，不妨碍你挑菌。

没长出来再挑再摇菌呗，小概率事件有的时候可以忽略。。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-03-29 21:56:48
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)
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一般都是生长12-16个小时才长好的。。。。
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3楼2011-03-29 21:59:49
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
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lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-03-29 22:57:46
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4楼2011-03-29 22:10:43
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-29 21:56:48:
培养16小时都没有关系的，呵呵。虽然有时候会长一点卫星菌落，但是卫星菌落很小，不妨碍你挑菌。

没长出来再挑再摇菌呗，小概率事件有的时候可以忽略。。

谢谢，我就觉得12个小时养不好，可我师兄一再坚持，我从没见过12个小时养好的，呵呵。
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5楼2011-03-29 22:13:52
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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lstt09nk(金币+2): 鼓励 2011-03-29 22:57:55
引用回帖:
Originally posted by dongxiao1214 at 2011-03-29 22:13:52:
谢谢，我就觉得12个小时养不好，可我师兄一再坚持，我从没见过12个小时养好的，呵呵。

不知道你用的哪个宿主，DH5a长12个小时一般不会很大。top10的菌落长的比较饱满。

一般我们都是用LB培养，如果用营养更丰富的SOC培养的话，12个小时就会长很好了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2011-03-29 22:19:08
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
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看天(金币+1): 鼓励交流 2011-03-30 12:20:05
我现在都是下午4,5点就划线，第二天早上八点就就可以了，一般12-16小时就可以，单菌落长的太大了就不好
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I am not a hero , but I served with heroes！
7楼2011-03-29 23:00:50
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-29 22:19:08:
不知道你用的哪个宿主，DH5a长12个小时一般不会很大。top10的菌落长的比较饱满。

一般我们都是用LB培养，如果用营养更丰富的SOC培养的话，12个小时就会长很好了。

DH5a和top10我都养，含有重组质粒的，是不是转了重组质粒的长的都比较慢，我上次从长了14小时的平板挑的单克隆摇菌都不行。
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8楼2011-04-01 21:52:17
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2011-03-29 23:00:50:
我现在都是下午4,5点就划线，第二天早上八点就就可以了，一般12-16小时就可以，单菌落长的太大了就不好

单菌落长得太大是不是会有变异啊
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9楼2011-04-01 21:53:14
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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引用回帖:
Originally posted by dongxiao1214 at 2011-04-01 21:52:17:
DH5a和top10我都养，含有重组质粒的，是不是转了重组质粒的长的都比较慢，我上次从长了14小时的平板挑的单克隆摇菌都不行。

不会啊，呵呵。你转进去的东西对宿主有毒害？
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2011-04-01 21:55:56
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