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muzheng88

铁虫 (小有名气)

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[求助] 用液体培养基把大肠杆菌摇出来了，但是接种到平板上怎么就一点不长呢

如题，取1mL大肠杆菌原液（冰箱里4℃五个月，液体培养基）在三角瓶里的液体培养基中，摇了一天没长出来，但是在之后的5个小时内液体培养基变浑浊了，然后我又摇了10个小时。我取其1mL稀释了10的四次方，五次方和六次方做平板，一个菌都没长，哪些大虾帮帮忙，分析下原因，怎么就没长菌落呢。

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1楼2013-01-10 20:32:23

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肥猫p

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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1.你做个G染色，看看是不是有很多大肠杆菌。
2.平板的培养基，我觉得大肠挺容易长的吧，一般培养基的营养都ok啊。你调下ph7.2~7.4试试。
3.是不是稀释的时候不匀或者涂布的时候烫死了？你试试直接用接种环沾点菌液，三区划线？
4.如果你的大肠杆菌是有抗性的，但是你刚刚活化，先不要往培养基里面加抗生素吧，等它在普通平板长出来之后，再往有抗生素的平板转接，抗生素浓度先低一些，再逐渐升高。
以上是个人愚见，如有不对的，不要喷我哦

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2楼2013-01-10 22:09:28

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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

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【答案】应助回帖

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laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励应助！ 2013-01-11 18:45:31

1.用同样的培养基不加接种的菌液摇48h看看有没有浑浊——判断是否培养过程污染；
2.不稀释，直接用原液接种平板——判断是否稀释倍数过高（可能性不大，都浑浊了，起码10E7）；
3.用平板涂布法，不用倾注法——可能细菌刚刚复苏，抗性不大，像楼上说的，被烫死了（最可能的原因）；
4.直接用非选择性培养基NA、TSA、LB+Agar试试，用平板涂布法

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环境卫生、微生物学、卫生应急