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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 用液体培养基把大肠杆菌摇出来了，但是接种到平板上怎么就一点不长呢
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muzheng88

铁虫 (小有名气)

[求助] 用液体培养基把大肠杆菌摇出来了，但是接种到平板上怎么就一点不长呢

如题，取1mL大肠杆菌原液（冰箱里4℃五个月，液体培养基）在三角瓶里的液体培养基中，摇了一天没长出来，但是在之后的5个小时内液体培养基变浑浊了，然后我又摇了10个小时。我取其1mL稀释了10的四次方，五次方和六次方做平板，一个菌都没长，哪些大虾帮帮忙，分析下原因，怎么就没长菌落呢。
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1楼 2013-01-10 20:32:23
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励应助！ 2013-01-11 18:44:40
1.你做个G染色，看看是不是有很多大肠杆菌。
2.平板的培养基，我觉得大肠挺容易长的吧，一般培养基的营养都ok啊。你调下ph7.2~7.4试试。
3.是不是稀释的时候不匀或者涂布的时候烫死了？你试试直接用接种环沾点菌液，三区划线？
4.如果你的大肠杆菌是有抗性的，但是你刚刚活化，先不要往培养基里面加抗生素吧，等它在普通平板长出来之后，再往有抗生素的平板转接，抗生素浓度先低一些，再逐渐升高。
以上是个人愚见，如有不对的，不要喷我哦
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2楼2013-01-10 22:09:28
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励应助！ 2013-01-11 18:45:31
1.用同样的培养基不加接种的菌液摇48h看看有没有浑浊——判断是否培养过程污染；
2.不稀释，直接用原液接种平板——判断是否稀释倍数过高（可能性不大，都浑浊了，起码10E7）；
3.用平板涂布法，不用倾注法——可能细菌刚刚复苏，抗性不大，像楼上说的，被烫死了（最可能的原因）；
4.直接用非选择性培养基NA、TSA、LB+Agar试试，用平板涂布法
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环境卫生、微生物学、卫生应急
3楼2013-01-11 00:38:58
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xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

4度5个月的菌种还能用？换-80度的吧
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6楼2013-01-11 12:53:57
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普通回帖

xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
染菌 抗性平板杀死了非E.coli
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4楼2013-01-11 12:47:53
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xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

或者长出的是无抗性E.coli 上抗性平板不长
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5楼2013-01-11 12:50:12
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是已经死了，你摇出来的是杂菌，所以涂板没有抗性不长
杂菌本身没有什么抗性，在在你液体培养基中慢慢诱导出来的
有可能哦
我们实验室诱导耐药菌株都是这样慢慢诱导的
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
7楼2013-01-11 17:11:44
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飞翔的鹰sclg

新虫 (初入文坛)
我的也是，隔一段时间没做实验，开始做了就是不长
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8楼2013-04-02 21:15:06
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1921952610

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你摇瓶时会不会是杂菌啊？？镜检一下试试看
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9楼2013-04-03 13:32:53
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yinditongfei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫回帖应助 2013-07-23 17:16:03
我当时培养的变形链球菌就是试管里有（但是不是摇的，就是同等条件下和平板一起养的），平板上没有。

大概就这么反复在试管里接种，反复涂板大约一个星期之后，才有菌长出来。鉴定后确定是我要的菌。

不过我的是变形链球菌在-70复苏时候遇到的问题。不知道能不能帮上你。
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10楼2013-04-03 16:28:34
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