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muzheng88

铁虫 (小有名气)

[求助] 用液体培养基把大肠杆菌摇出来了,但是接种到平板上怎么就一点不长呢

如题,取1mL大肠杆菌原液(冰箱里4℃五个月,液体培养基)在三角瓶里的液体培养基中,摇了一天没长出来,但是在之后的5个小时内液体培养基变浑浊了,然后我又摇了10个小时。我取其1mL稀释了10的四次方,五次方和六次方做平板,一个菌都没长,哪些大虾帮帮忙,分析下原因,怎么就没长菌落呢。
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励应助! 2013-01-11 18:44:40
1.你做个G染色,看看是不是有很多大肠杆菌。
2.平板的培养基,我觉得大肠挺容易长的吧,一般培养基的营养都ok啊。你调下ph7.2~7.4试试。
3.是不是稀释的时候不匀或者涂布的时候烫死了?你试试直接用接种环沾点菌液,三区划线?
4.如果你的大肠杆菌是有抗性的,但是你刚刚活化,先不要往培养基里面加抗生素吧,等它在普通平板长出来之后,再往有抗生素的平板转接,抗生素浓度先低一些,再逐渐升高。
以上是个人愚见,如有不对的,不要喷我哦
2楼2013-01-10 22:09:28
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励应助! 2013-01-11 18:45:31
1.用同样的培养基不加接种的菌液摇48h看看有没有浑浊——判断是否培养过程污染;
2.不稀释,直接用原液接种平板——判断是否稀释倍数过高(可能性不大,都浑浊了,起码10E7);
3.用平板涂布法,不用倾注法——可能细菌刚刚复苏,抗性不大,像楼上说的,被烫死了(最可能的原因);
4.直接用非选择性培养基NA、TSA、LB+Agar试试,用平板涂布法
环境卫生、微生物学、卫生应急
3楼2013-01-11 00:38:58
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xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

4度5个月的菌种还能用?换-80度的吧
6楼2013-01-11 12:53:57
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普通回帖

xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染菌 抗性平板杀死了非E.coli
4楼2013-01-11 12:47:53
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xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

或者长出的是无抗性E.coli 上抗性平板不长
5楼2013-01-11 12:50:12
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是已经死了,你摇出来的是杂菌,所以涂板没有抗性不长
杂菌本身没有什么抗性,在在你液体培养基中慢慢诱导出来的
有可能哦
我们实验室诱导耐药菌株都是这样慢慢诱导的
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
7楼2013-01-11 17:11:44
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飞翔的鹰sclg

新虫 (初入文坛)

我的也是,隔一段时间没做实验,开始做了就是不长
8楼2013-04-02 21:15:06
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1921952610

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你摇瓶时会不会是杂菌啊??镜检一下试试看
9楼2013-04-03 13:32:53
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yinditongfei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫回帖应助 2013-07-23 17:16:03
我当时培养的变形链球菌就是试管里有(但是不是摇的,就是同等条件下和平板一起养的),平板上没有。

大概就这么反复在试管里接种,反复涂板大约一个星期之后,才有菌长出来。鉴定后确定是我要的菌。

不过我的是变形链球菌在-70复苏时候遇到的问题。不知道能不能帮上你。
10楼2013-04-03 16:28:34
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