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爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)

[交流] 转化后培养基上的单菌落怎么那么少,还有卫星菌落 已有6人参与

转化后,在有氨苄青霉素的LB培养基上培养,一个板上只有几个菌落,还有一部分是卫星菌落,有的说是放在培养箱里久了就长成了卫星菌落,可有的说放再久也不会长成卫星菌落,如果是卫星菌落说是可能是污染的。一个板上不怎么也应该有300个单菌落吗?我的怎么只有几个。PCR后发现是我要的1600pb,但我怕是污染的。是不是链接的问题,时间短,效率低,只连接上了一小部分才出现这种情况啊。
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爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a13515517892 at 2015-06-09 22:11:25
请问你涂板是怎么涂的,转化后直接涂布还是离心涂布的,或者涂布的量多大,连接一般连大概半小时就ok,

直接涂板的,一个板加入了100微升
3楼2015-06-09 23:58:49
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a13515517892

木虫 (小有名气)

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请问你涂板是怎么涂的,转化后直接涂布还是离心涂布的,或者涂布的量多大,连接一般连大概半小时就ok,
2楼2015-06-09 22:11:25
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a13515517892

木虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱琪琪吉子77 at 2015-06-09 23:58:49
直接涂板的,一个板加入了100微升...

如果直接涂布的斑少,可以离心涂布
4楼2015-06-10 08:23:59
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shiqili471

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌落PCR筛出阳性否,如果能做出来,应该没啥问题,只是转化效率低。
5楼2015-06-10 19:10:47
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