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PCR扩增基因出现问题怎么办
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八瓣格桑cav
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PCR扩增基因出现问题怎么办
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同样的引物刚开始用着还好,扩增出的片段经琼脂糖凝胶电泳检测后条带单一且较亮。但是后来扩增出的片段经琼脂糖凝胶电泳检测后条带变暗,再后来直接出现拖尾的情况。
不知是什么原因,请大神搭救。。
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1楼
2015-06-09 14:17:01
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福建啊萧
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专业: 微生物生理与生物化学
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1.没把buffer,引物,酶等完全溶解好再配MIX,2.把全部都换掉,重新做,里面肯定有管污染了3.胶新配4.减少跑胶的量,浓度太高会拖带5.如果还不行,把引物,模板量减半试下
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10楼
2015-06-14 00:44:52
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stone2239
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感谢参与,应助指数 +1
应该是试剂的原因,引物、模板、酶一个个分析,重新稀释引物,重提模板,换新酶。
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2楼
2015-06-09 14:22:41
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八瓣格桑cav
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专业: 植物遗传学
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
stone2239
at 2015-06-09 14:22:41
应该是试剂的原因,引物、模板、酶一个个分析,重新稀释引物,重提模板,换新酶。
都做过啦,还是不行啊。
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3楼
2015-06-11 22:06:42
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luwei13566
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专业: 微生物生理与生物化学
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拖尾?点样孔亮不亮?LZ用的酶是否是mix?能不能把跑的图贴几张出来?
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大家相互帮助哈
4楼
2015-06-12 01:12:23
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