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青青雨季

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量PCR结果 已有1人参与

之前做一直挺好的,最近只换了模板;引物,反应条件都没变,跑完的结果一直不是单一的峰,是因为模板的问题吗?

实时荧光定量PCR结果
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实时荧光定量PCR结果-1
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
青青雨季: 金币+10 2015-06-04 09:10:14
如果不是同一遗传背景的模板,是有可能的。如果引物与新模板的目的区域结合更难,那么二聚体产生的可能性就更大。同样,如果新模板的核酸序列容易发生错配等,就有可能出现新的峰。
2楼2015-06-03 16:41:03
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青青雨季

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-03 16:41:03
如果不是同一遗传背景的模板,是有可能的。如果引物与新模板的目的区域结合更难,那么二聚体产生的可能性就更大。同样,如果新模板的核酸序列容易发生错配等,就有可能出现新的峰。

材料是一样的,我想知道如果模板降解了,会不会出现这样的问题
3楼2015-06-03 16:55:52
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晞朔

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 青青雨季 at 2015-06-03 16:55:52
材料是一样的,我想知道如果模板降解了,会不会出现这样的问题...

也有可能。你可以试着拿你的cDNA为模板,用内参基因检测一下。
4楼2015-06-03 16:57:17
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青青雨季

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-03 16:57:17
也有可能。你可以试着拿你的cDNA为模板,用内参基因检测一下。...

如果内参好着是不是就不是模板的原因了?
5楼2015-06-03 17:01:33
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晞朔

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 青青雨季 at 2015-06-03 17:01:33
如果内参好着是不是就不是模板的原因了?...

是的。
6楼2015-06-03 17:02:16
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