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青青雨季

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量PCR结果 已有1人参与

之前做一直挺好的，最近只换了模板；引物，反应条件都没变，跑完的结果一直不是单一的峰，是因为模板的问题吗？

实时荧光定量PCR结果
1.png


实时荧光定量PCR结果-1
2.png
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1楼 2015-06-03 16:03:00
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青青雨季

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-03 16:41:03
如果不是同一遗传背景的模板，是有可能的。如果引物与新模板的目的区域结合更难，那么二聚体产生的可能性就更大。同样，如果新模板的核酸序列容易发生错配等，就有可能出现新的峰。

材料是一样的，我想知道如果模板降解了，会不会出现这样的问题
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3楼2015-06-03 16:55:52
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
青青雨季: 金币+10 2015-06-04 09:10:14
如果不是同一遗传背景的模板，是有可能的。如果引物与新模板的目的区域结合更难，那么二聚体产生的可能性就更大。同样，如果新模板的核酸序列容易发生错配等，就有可能出现新的峰。
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2楼2015-06-03 16:41:03
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 青青雨季 at 2015-06-03 16:55:52
材料是一样的，我想知道如果模板降解了，会不会出现这样的问题...

也有可能。你可以试着拿你的cDNA为模板，用内参基因检测一下。
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4楼2015-06-03 16:57:17
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青青雨季

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-03 16:57:17
也有可能。你可以试着拿你的cDNA为模板，用内参基因检测一下。...

如果内参好着是不是就不是模板的原因了？
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5楼2015-06-03 17:01:33
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