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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 双酶切后目的片段找不见了
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noric4

铁杆木虫 (正式写手)

学习者

[求助] 双酶切后目的片段找不见了 已有2人参与

第一张是目的片段和载体连接之后转化到trans1t1挑菌pcr的结果，目的片段是1737
载体大小是5328
第二张是前面四个是pcr出目的片段的菌的质粒
后面四个是酶切后的
但是双酶切后木有目的片段了



有木有人遇到过类似问题，咋办呢

双酶切后目的片段找不见了
菌液pcr.jpg


双酶切后目的片段找不见了-1
质粒和双酶切.jpg
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1楼 2015-05-07 17:01:07
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:49:06
酶切以后应该比酶切前小，做个阳性对照，可能是你酶没加到。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
3楼2015-05-09 11:37:16
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:48:57
本帖内容被屏蔽
2楼2015-05-09 11:22:43
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noric4

铁杆木虫 (正式写手)

学习者
引用回帖:
2楼: Originally posted by mataomatao at 2015-05-09 11:22:43
为啥不用PCR  P出来的小片段酶切，连后续的载体

我只是在验证连接成功没有啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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前进前进前进进
4楼2015-05-09 16:15:21
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noric4

铁杆木虫 (正式写手)

学习者
引用回帖:
3楼: Originally posted by 781055707 at 2015-05-09 11:37:16
酶切以后应该比酶切前小，做个阳性对照，可能是你酶没加到。

原因找到了，应该是菌液污染，质粒pcr后并没有目的片段。应该是没有连接上

[ 发自小木虫客户端 ]
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前进前进前进进
5楼2015-05-09 16:16:31
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