应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 中高拷贝重组载体酶切验证正确，但是提出的质粒浓度一直很低
51/1返回列表
查看: 1914  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

潇潇溪

新虫 (初入文坛)

[求助] 中高拷贝重组载体酶切验证正确，但是提出的质粒浓度一直很低 已有4人参与

一个1000bp左右的条带连接到pQE30 载体上，菌落PCR验证正确，摇菌后提取质粒浓度很淡，但是酶切验证都正确。质粒浓度一直很淡，菌划线后重新挑取单菌落再提质粒还是很淡。且此片段连接过T载体，也是一样的情况。真是从来没有见过这种情况。请各位大侠帮帮找找问题。

中高拷贝重组载体酶切验证正确，但是提出的质粒浓度一直很低
20150430 pQE30-HA1 酶切验证.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-05 13:40:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh_9153

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 潇潇溪 at 2015-05-05 16:52:35
插入1000片段应该不会造成太大的负担，以前也做过更大的，都没有问题。如果实在不行，只能加大摇菌了。谢谢哈。...

我看成10000bp了~不好意思，1000bp没有问题的，你再试一下吧
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-05-06 09:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-05 22:36:51
潇潇溪: 金币+1, ★有帮助 2015-05-06 11:16:13
本帖内容被屏蔽
2楼2015-05-05 14:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh_9153

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-05 22:37:10
质粒过大影响拷贝数吧，加大一下摇菌体系，多收集几管然后合起来，浓度过低加一步沉淀
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-05-05 15:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzheng29

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的DNA插入片段对宿主细胞的生长有没有妨碍？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-05-05 15:17:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭