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潇潇溪

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 16
帖子: 13
在线: 4.5小时
虫号: 2557006
注册: 2013-07-21
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 中高拷贝重组载体酶切验证正确，但是提出的质粒浓度一直很低已有4人参与

一个1000bp左右的条带连接到pQE30 载体上，菌落PCR验证正确，摇菌后提取质粒浓度很淡，但是酶切验证都正确。质粒浓度一直很淡，菌划线后重新挑取单菌落再提质粒还是很淡。且此片段连接过T载体，也是一样的情况。真是从来没有见过这种情况。请各位大侠帮帮找找问题。

中高拷贝重组载体酶切验证正确，但是提出的质粒浓度一直很低

20150430 pQE30-HA1 酶切验证.jpg

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【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？已经有18人回复

1楼2015-05-05 13:40:42

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xiaoyangren7

金虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 700.1
散金: 200
红花: 4
帖子: 83
在线: 110.8小时
虫号: 2414666
注册: 2013-04-12
性别: MM
专业: 畜牧学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

不了解这个载体，有抗性筛选的就不会出现这样的问题，挑出来的单菌落都是有目的质粒的

10楼2015-05-08 09:17:31

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