应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » PCR之后跑胶有条带，测序测不出来
91/1返回列表
查看: 8443  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

[求助] PCR之后跑胶有条带，测序测不出来 已有8人参与

PCR之后跑胶有条带，且条带单一，但是送到公司测序一直测不出来？说是信号弱，测序失败，这是怎么回事？接下来怎么做？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-04-19 23:07:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌液太稀了呗！所以测不出来！你可以提质粒看看，再送

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-04-20 00:33:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-11 17:06:09
信号弱，可能是引物和模板结合不好，经常遇到这种情况，用的什么引物测的。实在不行，换个公司

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
3楼2015-04-20 08:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物和模板结合问题，可以提高循环数在试下
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-20 10:00:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
5楼2015-04-22 09:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzheng29

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-11 17:06:32
如果用的通用引物测序的话，可能引物和模板结合效果不太好，可以自己设计测序引物，一起送测序

也要考虑你的模板浓度是否达到要求
赞一下 回复此楼
6楼2015-04-22 17:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-11 17:06:39
测序PCR对样本和引物的要求都比较高，送样前应该先自己测一下浓度100ng每ul是足够了，其次引物的特异性，引物中是否存在简并碱基？这会影响样本与引物的结合度。引物TM值是多少，一般要控制在50左右，引物长度控制在17～24.以上都确保OK的话一般来说没有问题，实在不行连T载，T载拷贝数高，通用引物特异性好，不会测不出来的，除非刚开始就遇到高级结构测序中断。
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-10 16:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

打败番茄炒蛋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-11 17:06:50
我也遇见过这种情况，是送去华大测的序没有测出。
但幸亏当时P了两管，第二管送去生工测序测出了，可能是公司的原因，当然也有可能是你P的浓度不够，还要注意这些测序公司要求送样的量，华大低于30ul基本是给你测不出来的（虽然他们公司来取样的保证说能测出来。。）
赞一下 回复此楼
天生自弃难丽质
8楼2015-05-10 19:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到过这种情况 开始送的一家公司 测序失败 后来我换了一个公司 而且我是又培养了一夜之后送去的 不知道跟这个有没有关系 你可以试着换个公司
赞一下 回复此楼
9楼2015-05-11 16:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 NSDSKY_LZM 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 18:58 by lXgU0RvNTDC9
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 18:55 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 18:46 by lXgU0RvNTDC9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖？ +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭