| 查看: 9687 | 回复: 10 | |||
[交流]
质粒双酶切后回收效率非常低 已有6人参与
|
|
400bp目的片段连接在Puc57上，载体大小4-5K，体系为50ul，SpeI和AscI各1ul双酶切，延长酶切时间，回收后浓度只有4ng/ul，同时对表达载体（约10K）酶切回收后的浓度为40ng/ul，目的片段这么低的浓度能够进行连接吗? 如果我把目的片段先扩出来，纯化后再双酶切，这样会不会好一点，只是有一点担心的是片段太小，会不会回收不到？有做过400bp片段PCR后双酶切的吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有64人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切得到的500bp的片段回收效果不好，是怎么个情况？
已经有8人回复
- T-RFLP中回收及酶切相关问题
已经有17人回复
- 酶切是只有一个保护碱基能切开吗
已经有9人回复
- 质粒提取后进行双酶切无目的基因
已经有13人回复
- PBⅠ121质粒双酶切问题
已经有7人回复
- 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！
已经有49人回复
- 双酶切总是切不开。。。有没有人用过NEB的NotI这个酶？
已经有36人回复
- pet32a做载体，结果这一块做了三个月了还没连接成功
已经有30人回复
- 眼含热泪求助：pcDNA3.1 插入4000bp 质粒构建，大虾请留步
已经有6人回复
- 连接效率低，重组质粒无法酶切
已经有5人回复
- 一个关于酶切后质粒载体构建的问题
已经有6人回复
- 重组质粒双酶切
已经有7人回复
- 关于双酶切的酶的失活问题
已经有6人回复
- 重组质粒酶切验证没有目的条带
已经有7人回复
- 双酶切后是否还要胶回收
已经有4人回复
- T载体与目的片段大小一致时,怎么酶切回收啊
已经有10人回复
- 载体双酶切后，胶回收的效率极低，胶回收试剂盒正常，双酶切后的电泳图也正常，
已经有13人回复
- 关于双酶切后回收的问题
已经有12人回复
- 双酶切后目的条带很淡，回收不到
已经有15人回复
- 各种综合问题：酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
已经有7人回复
- 构建基因文库（sauA酶切后胶回收 效率低 该怎么办
已经有14人回复
- 酶切酶连转化后单克隆检测不对
已经有8人回复
- 双酶切后目的片段变大
已经有11人回复
- 连接产物双酶切
已经有11人回复
- 关于一个载体pGZRS-38的XbaI&SacI双酶切的问题
已经有5人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
2楼2015-04-08 01:00:36
3楼2015-04-08 02:01:42
4楼2015-04-08 03:36:40
5楼2015-04-08 03:41:02
6楼2015-04-08 17:07:10
7楼2015-04-08 17:23:51
8楼2015-04-09 20:21:24
9楼2015-04-09 20:22:20
wshi85
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1495.7
- 散金: 8
- 红花: 5
- 帖子: 687
- 在线: 213.9小时
- 虫号: 584125
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
10楼2015-04-09 20:56:09
