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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切是只有一个保护碱基能切开吗
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why025

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶切是只有一个保护碱基能切开吗 已有4人参与

我记得老师讲的时候好像能切开，有人这样切过么，能切开吗？
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1楼 2014-09-10 10:01:03
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huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
why025(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 18:17:21
一般情况先连接到T载体上，再酶切这样效率非常高，如果P完直接酶切效率非常低，像楼主这样只有一个保护碱基更难切！祝好运！
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2楼2014-09-10 14:56:49
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主可以把实验情况多说几句，我看网上也有一个保护碱基的，不过效率会很低，最好多几个碱基吧
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3楼2014-09-10 16:06:34
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why025

铁虫 (小有名气)
我现在比较关心的其实是这个基础的问题，而不是如何绕过他做实验的问题
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4楼2014-09-10 20:11:56
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也认为是效率的问题， 根据各种酶自身不同程度不一样的。
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5楼2014-09-10 20:57:32
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lingsheshidu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by why025 at 2014-09-10 20:11:56
我现在比较关心的其实是这个基础的问题，而不是如何绕过他做实验的问题

楼主问从理论上能否切开吗？肯定能啊，只是效率比较低而已，至于效率低到什么程度跟你用的酶切位点有关系。
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积累知识，抓紧奋斗！
6楼2014-09-10 21:11:16
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liukun261

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why025(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-11 09:28:34
本帖内容被屏蔽
7楼2014-09-10 22:21:20
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liukun261

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
why025(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-11 09:28:44
why025: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-09-11 21:03:30
本帖内容被屏蔽
8楼2014-09-10 22:27:14
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qauzgd

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by liukun261 at 2014-09-10 22:21:20
楼主好，
其实有几个碱基不是很重要的，关键是要参考酶切位点保护碱基表的，那个表上面写的很想清楚的。你要加几个碱基是根据你用的酶是什么，然后根据酶切位点保护碱基表对照的加就可以了！！！

很多人说保护碱基只要个数对就好，至于是哪个碱基完全看GC含量，不知道是不是这样啊，谢谢！
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9楼2014-09-13 19:43:02
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liukun261

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
10楼2014-09-14 08:30:27
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