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【求助/交流】选择酶切位点
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梦里沙漠
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[交流]
【求助/交流】选择酶切位点
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选择多克隆位点处的酶切位点时,离得太近的两个位点是不是不好啊?
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1楼
2010-08-04 15:41:30
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noheartman
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-08-04 16:11:38
两个酶切位点的距离不是什么大问题,而是你的目的基因离起始密码子ATG的距离啊,一是容易产生移码,二是会表达多余的氨基酸。
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2楼
2010-08-04 15:45:10
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专业: 微生物生理与生物化学
谢谢!
目的基因与起始密码子的距离?它们还有距离吗?你说的问题是指设计引物时由于加入酶切位点引起的移码突变吗?
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3楼
2010-08-04 16:15:48
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xiangao
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小木虫(金币
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“离得太近”指几个 是切不好
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2010-08-04 16:21:48
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wuer413023
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reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-05 06:00:23
原则上两个酶切位点的距离要大于内切酶所识别的碱基数目,离的太近影响酶切效果
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上邪!我欲与君相知,长命无绝衰。山无陵,江水为竭,冬雷震震,夏雨雪,天地合,乃敢与君绝!
5楼
2010-08-04 16:26:01
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中间隔了两个酶切位点没问题吧?
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2010-08-04 17:41:54
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中间隔了两个酶切位点没问题绝对没问题,能切开的。
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7楼
2010-08-04 18:14:36
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louli
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没关系,中间只要隔几个碱基就行了
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8楼
2010-08-04 22:31:13
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rosalie161
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最好间隔3个碱基以上。一般在引物上设计酶切位点的时候都在前面加NNN。
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Rosalei.....
9楼
2010-08-05 09:15:58
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