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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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梦里沙漠

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】选择酶切位点 已有7人参与

选择多克隆位点处的酶切位点时,离得太近的两个位点是不是不好啊?
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noheartman

金虫 (小有名气)

★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-08-04 16:11:38
两个酶切位点的距离不是什么大问题,而是你的目的基因离起始密码子ATG的距离啊,一是容易产生移码,二是会表达多余的氨基酸。
2楼2010-08-04 15:45:10
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梦里沙漠

金虫 (小有名气)

谢谢!

目的基因与起始密码子的距离?它们还有距离吗?你说的问题是指设计引物时由于加入酶切位点引起的移码突变吗?
3楼2010-08-04 16:15:48
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xiangao

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
“离得太近”指几个   是切不好
4楼2010-08-04 16:21:48
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wuer413023

至尊木虫 (文坛精英)

没事领金币


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-05 06:00:23
原则上两个酶切位点的距离要大于内切酶所识别的碱基数目,离的太近影响酶切效果
上邪!我欲与君相知,长命无绝衰。山无陵,江水为竭,冬雷震震,夏雨雪,天地合,乃敢与君绝!
5楼2010-08-04 16:26:01
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梦里沙漠

金虫 (小有名气)

中间隔了两个酶切位点没问题吧?
6楼2010-08-04 17:41:54
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


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中间隔了两个酶切位点没问题绝对没问题,能切开的。
7楼2010-08-04 18:14:36
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louli

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没关系,中间只要隔几个碱基就行了
8楼2010-08-04 22:31:13
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rosalie161

金虫 (正式写手)


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最好间隔3个碱基以上。一般在引物上设计酶切位点的时候都在前面加NNN。
Rosalei.....
9楼2010-08-05 09:15:58
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