24小时热门版块排行榜    

查看: 1797  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1279341226

新虫 (初入文坛)

[求助] 请分子生物学高手帮忙看看下面的PCR体系... 已有4人参与

Each primer pair was used in 20 μl  volume reactions containing 300 nM dNTPs (Eppendorf AG, Hamburg, Deutschland),1×DNA pol buffer (Biotools BandM labs S.A., Madrid, Spain),
3 mM MgCl2 (Biotools), 0.75  μ DNA polymerase (Biotools), 10 pmol each primer (depending on marker), and 10 ng of total DNA.
       本人在用通用引物 LCO1498 and HCO2198 扩寄生蜂线粒体基因 coi ,无奈老是做不出来,想按照文献上别人的方法试试,可是体系怎么看不懂呢,括号后面的是生物公司还是某什么啊,我用的是TaKaRa 公司的酶( 5U/ μl ),10×PCR Buffer( with Mg2+ ) , dNTP Mixture(各 2.5 mM),  他们用的试剂可以在哪个公司订到吗?急!急!!急!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1279341226

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dehong1573 at 2015-04-07 08:17:14
基本不用参考文献的PCR体系,只要引物序列一样,模版一样就可以,你需要关注的是你自己用的酶的条件,楼上问了什么酶,楼主却只说takara,说明楼主对PCR酶了解不多,PCR用的酶有很多种,有容易扩增的easytaq、高保真 ...

那我这种情况用哪种酶比较好呢,首先虫子太小,都是单头无损伤提取的,可能得到的模板浓度也比较低,扩增核基因 28s 很容易,但是要扩增的另一段线粒体基因 coi 就不行,可能线粒体基因要求的模板浓度比较高吧,总之就是扩不出来呀。。
10楼2015-04-07 17:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

-字仲康

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2015-04-03 23:07:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

-字仲康

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2015-04-03 23:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1279341226

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by -字仲康 at 2015-04-03 23:07:46
额,论坛是怎么了,怎么那么冷清。我是复制查看了一下你说的括号里面的东西,应该是产地和公司之类的吧
你写出来的是产品的说明书么。扩增不出来,看你用的是什么聚合酶,建议是看看说明书

不是说明书,是看的文献里面人家的体系,我用的是TaKaRa普通酶,曾按照酶说明书上的体系试过,还是做不出来啊,忧伤额。。。
4楼2015-04-06 20:35:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 15:10 by QXtWNz7PI7wZ
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 14:41 by QXtWNz7PI7wZ
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 11:41 by KxMI1BYBxWX1
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见