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qiaobethy

铁虫 (初入文坛)

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[求助] PCR扩增后无条带，但能提出质粒已有5人参与

做实验时PCR扩增后跑胶无条带，但是接着提质粒却能提出来。请问哪位碰到过相似的问题吗，求解答。
上面的图是质粒，下面的图是PCR扩增

PCR扩增后无条带，但能提出质粒

2015-3-19-01.jpg

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屈从于现实的温暖

1楼 2015-03-19 13:11:41

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sh_9153

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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qiaobethy: 金币+5, ★有帮助 2015-03-20 13:02:21

1.运用的菌株是哪一个，是否是适合菌体PCR
2. PCR条件是否合适，退火温度是不是较高

赞一下(2人)

7楼2015-03-19 18:47:41

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查看全部 10 个回答

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

看第二张图，跟没有模板似的，难道是模板被酶降解了？

todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

2楼2015-03-19 14:35:16

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qiaobethy

铁虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-19 14:35:16
看第二张图，跟没有模板似的，难道是模板被酶降解了？

不会吧,我的模板是挑的菌混合的无菌水，是早上刚挑的。

屈从于现实的温暖

3楼2015-03-19 14:51:25

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781055707

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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用载体通用引物PP看，不行就测序看看。后面三个不是P出来了吗？楼主的pcr阴性是哪个

采菊东篱下，悠然见南山。

4楼2015-03-19 16:09:17

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