应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增后无条带，但能提出质粒
101/1返回列表
查看: 1656  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qiaobethy

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增后无条带，但能提出质粒 已有5人参与

做实验时PCR扩增后跑胶无条带，但是接着提质粒却能提出来。请问哪位碰到过相似的问题吗，求解答。
上面的图是质粒，下面的图是PCR扩增

PCR扩增后无条带，但能提出质粒
2015-3-19-01.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
屈从于现实的温暖
1楼 2015-03-19 13:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看第二张图，跟没有模板似的，难道是模板被酶降解了？
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-03-19 14:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaobethy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-19 14:35:16
看第二张图，跟没有模板似的，难道是模板被酶降解了？

不会吧,我的模板是挑的菌混合的无菌水，是早上刚挑的。
赞一下 回复此楼
屈从于现实的温暖
3楼2015-03-19 14:51:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用载体通用引物PP看，不行就测序看看。后面三个不是P出来了吗？楼主的pcr阴性是哪个
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-03-19 16:09:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by qiaobethy at 2015-03-19 14:51:25
不会吧,我的模板是挑的菌混合的无菌水，是早上刚挑的。...

没有，我是是被酶降解，使用高保真酶的话就有可能
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-03-19 16:59:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

素锦流年1991

新虫 (初入文坛)
PCR条件合适吗，建议查找PCR条件，可将你提到的质粒做模板进行PCR,看结果，第二个图是菌落PCR吗，如果是的话，做菌落PCR时是否将细菌裂解
赞一下 回复此楼
6楼2015-03-19 18:26:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh_9153

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiaobethy: 金币+5, ★有帮助 2015-03-20 13:02:21
1.运用的菌株是哪一个，是否是适合菌体PCR
2. PCR条件是否合适，退火温度是不是较高
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2015-03-19 18:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhao0hong

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
显然质粒是假的，没有模板序列，测个序就知道了。做pcr连阳性对照都没有！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-03-19 19:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能提出来的质粒是空载体。你肯定做完菌落PCR，然后挑菌提的质粒，那你最后不是该挑能扩出你目的基因的菌吗？那对应图里里挑的哪个菌？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
9楼2015-03-19 19:36:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaobethy

铁虫 (初入文坛)
谢谢各位，重新挑菌扩PCR，结果能出来。不知道为什么连续做不行，难道是量的问题。
赞一下 回复此楼
屈从于现实的温暖
10楼2015-03-20 13:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qiaobethy 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +33 医学老男孩 2026-08-13 80/4000 2026-08-17 14:40 by yq199112088
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +3 angus9576 2026-08-17 6/300 2026-08-17 14:32 by 启萌科技
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭