应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 半定量RT-PCR中的引物二聚体
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2205  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lu12306

新虫 (初入文坛)

[求助] 半定量RT-PCR中的引物二聚体 已有2人参与

最近在做半定量RT-PCR，从cDNA中能批出目的基因和内参基因，但胶的下面会有引物二聚体。我想问一下做半定量RT-PCR实验是不是得要求没有引物二聚体？引物二聚体会影响结果吗？如果有影响是不是只能重新设计引物？谢谢大家的解答啦！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-29 21:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:43:34
我做的时候也是有大量的引物二聚体，比目的条带亮的多，但是应该不影响结果，所以没必要太担心，加油，祝好
赞一下 回复此楼
我要让你的生活因为有我而更精彩
3楼2015-01-04 16:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:43:31
有引物二聚体应该没什么关系，但还是应该尽量避免或者要很淡，建议PCR体系中引物可以减少试试
赞一下 回复此楼
医学&统计学
2楼2015-01-04 15:48:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu12306

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-04 15:48:27
有引物二聚体应该没什么关系，但还是应该尽量避免或者要很淡，建议PCR体系中引物可以减少试试

谢谢你的答复。我发现如果我在PCR仪升到72度以上再放样进去，引物二聚体会少很多。很开心！
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-05 10:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu12306

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 甲方不怕乙方 at 2015-01-04 16:31:15
我做的时候也是有大量的引物二聚体，比目的条带亮的多，但是应该不影响结果，所以没必要太担心，加油，祝好

谢谢你的鼓励！我还想问一下：1.我做不同组织的半定量，还需要摸索不同组织的最佳循环数吗？ 2.同管扩增的话，是将PCR体系乘以2倍吗？3.我扩增的目的基因约1000bp，是不是太大？对结果有影响？有人建议做300-500bp的。这有硬性要求吗？4.你觉得我这个18SrRNA的最佳循环数应该是多少？怎么确定的？
半定量RT-PCR中的引物二聚体
18SRNA最佳循环数.PNG
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-05 11:34:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂310 +7 温柔的晚安 2026-03-25 8/400 2026-03-29 01:09 by 我是小康
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-28 3/150 2026-03-28 23:58 by wxiongid
[考研] 材料学硕333求调剂 +10 北道巷 2026-03-24 10/500 2026-03-28 23:06 by 无际的草原
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 329求调剂 +6 星野? 2026-03-26 6/300 2026-03-28 14:14 by 唐沐儿
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +7 麻辣鱿鱼 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:17 by zllcz
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗？ +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭