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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 双酶切，第一个大小片段都很亮，但是第二个小片段有些弥散，是为什么啊？
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odelay

铜虫 (小有名气)

[交流] 双酶切，第一个大小片段都很亮，但是第二个小片段有些弥散，是为什么啊？

我做的两个基因的双酶切，切了一天一夜，第一个大小片段都很亮，但是第二个小片段有些弥散且模糊不亮，是为什么啊？DL2000的MAKER.

双酶切，第一个大小片段都很亮，但是第二个小片段有些弥散，是为什么啊？
Administrator 2014-12-10 14hr 38min.jpg
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1楼 2014-12-17 10:07:00
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odelay

铜虫 (小有名气)
我切的是质粒，求帮助啊，是因为质粒提的不好吗
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2楼2014-12-17 10:17:08
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
marker没有跑开，酶切的第二段大小是多少？
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踏实
3楼2014-12-17 14:26:56
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odelay

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hajierlove at 2014-12-17 14:26:56
marker没有跑开，酶切的第二段大小是多少？

600多bp啊，什么原因呢
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4楼2014-12-17 15:20:36
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嘿小杨同志

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
什么酶切位点 怎么切了24小时？

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-12-17 16:54:29
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odelay

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 嘿小杨同志 at 2014-12-17 16:54:29
什么酶切位点 怎么切了24小时？

sal和not1
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6楼2014-12-17 20:25:34
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witake

银虫 (正式写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-20 23:31:11
酶切反应一般2小时内完成，如果模板很多的话可以相应增加酶切时间，但最好不要超过8小时。
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7楼2014-12-17 20:27:36
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odelay

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by witake at 2014-12-17 20:27:36
酶切反应一般2小时内完成，如果模板很多的话可以相应增加酶切时间，但最好不要超过8小时。

切的太久会造成拖尾吗
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8楼2014-12-17 20:51:58
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嘿小杨同志

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
切得太久 有些酶会乱切  质粒本身也会降解
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9楼2014-12-17 21:21:45
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oaixlittle

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒双酶切，大小片段的摩尔比是1:1，所以大片段肯定是比小片段亮的
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10楼2014-12-18 16:28:47
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