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laozake

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr电泳结果怎么是这样,求大神指导 已有9人参与

怎么改进啊?已经这样好久了,这还有点条带,很多时候都是整个泳道是亮的,以前可以P出来,效果很好,突然就这样了,求大神,前辈们指导啊!!!!!

我的pcr电泳结果怎么是这样,求大神指导
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稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by laozake at 2014-12-12 15:09:43
marker跑出来是没有问题的,模板也是新的,我基本上把所有的东西都换成新的了,还是不行。...

你确定都换了新的也不行?引物也用重新稀释的了?一个个排除,或许你漏掉了,pcr水也没问题?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
9楼2014-12-12 16:52:40
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查看全部 17 个回答

意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozake: 金币+2 2014-12-12 15:06:43
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:45:46
首先,你先测下DNA质量,
其次,你点个marker看看胶是否有问题,
第三,调整DNA和引物的比例。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-12 14:17:54
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-12-12 14:17:54
首先,你先测下DNA质量,
其次,你点个marker看看胶是否有问题,
第三,调整DNA和引物的比例。

如果是引物特异性不好,可以做个slowdown或者touchdown试试!

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-12-12 14:19:13
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稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:45:57
Marker一定要点,因为它可以用来排除是否是电泳,比如胶不均匀,电压,缓冲液等存在问题。以前可以P出来说明引物及反应程序也没问题,那你就要检测是不是模板,dntp,酶哪个出了问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
4楼2014-12-12 14:50:19
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