| 查看: 815 | 回复: 3 | ||
NanHao1991铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
PCR没有条带，求助已有3人参与
|
|
序列如下： atgtctttgaacgactttcaaaagcaacaaaagcaggccgctcccaaaccaaagaagactttgaagcttgtctccagttccggtatcaagttggccaatgctaccaagaaggttggcacaaaacctgccgaatctgataagaaagaggaagagaagtctgctgaaaccaaagaaccaactaaagagccaacaaaggtcgaagaaccagttaaaaaggaggagaaaccagtccagactgaagaaaagacggaggaaaaatcggaacttccaaaggtagaagaccttaaaatctctgaatcaacacataataccaacaatgccaatgttaccagtgctgatgccttgatcaaggaacaggaagaagaagtggatgacgaagttgttaacgatatgtttggtggtaaagatcacgtttctttaattttcatgggtcatgttgatgccggtaaatctactatgggtggtaatctactatacttgactggctctgtggataagagaactattgagaaatatgaaagagaagccaaggatgcaggcagacaaggttggtacttgtcatgggtcatggataccaacaaagaagaaagaaatgatggtaagactatcgaagttggtaaggcctactttgaaactgaaaaaaggcgttataccatattggatgctcctggtcataaaatgtacgtttccgagatgatcggtggtgcttctcaagctgatgttggtgttttggtcatttccgccagaaagggtgagtacgaaaccggttttgagagaggtggtcaaactcgtgaacacgccctattggccaagacccaaggtgttaataagatggttgtcgtcgtaaataagatggatgacccaaccgttaactggtctaaggaacgttacgaccaatgtgtgagtaatgtcagcaatttcttgagagcaattggttacaacattaagacagacgttgtatttatgccagtatccggctacagtggtgcaaatttgaaagatcacgtagatccaaaagaatgcccatggtacaccggcccaactctgttagaatatctggatacaatgaaccacgtcgaccgtcacatcaatgctccattcatgttgcctattgccgctaagatgaaggatctaggtaccatcgttgaaggtaaaattgaatccggtcatatcaaaaagggtcaatccaccctactgatgcctaacaaaaccgctgtggaaattcaaaatatttacaacgaaactgaaaatgaagttgatatggctatgtgtggtgagcaagttaaactaagaatcaaaggtgttgaagaagaagacatttcaccaggttttgtactaacatcgccaaagaaccctatcaagagtgttaccaagtttgtagctcaaattgctattgtagaattaaaatctatcatagcagccggtttttcatgtgttatgcatgttcatacagcaattgaagaggtacatattgttaagttattgcacaaattagaaaagggtaccaaccgtaagtcaaagaaaccacctgcttttgctaagaagggtatgaaggtcatcgctgttttagaaactgaagctccagtttgtgtggaaacttaccaagattaccctcaattaggtagattcactttgagagatcaaggtaccacaatagcaattggtaaaattgttaaaattgccgagtaatc 上游引物： aacaggatccatgtcggattcaaacTCTAGAtctGAATTCatgtctttgaacgact 注：aacaggatccatgtcggattcaaacTCTAGAtctGAATTC是添加的酶切位点和一段多肽； 下游引物： ggcggGAgctctTgattactcggc 该对引物怎么做都做不出来，试过各种条件，后来发现是上游引物3’端有发夹结构。 于是，将上游引物拆成F1和F2两个引物，如下： F-1 tcaaacTCTAGAtctGAATTCatgtctttgaacgact F-2 aacaggatccatgtcggattcaaacTCTAGAtctG 策略是: 1. 用F1和R扩增出短序列（红色）； 2. 用上步产物做模板，用F2和R扩增出长序列（蓝色）。 目前卡在1了，死活扩增不出短序列。跑胶结果显示引物区域很亮，引物都在内耗啊。。。 这是怎么回事啊，是引物设计的问题吗？有没有哪位能帮忙看下引物啊，虽然有些互补但都是必要序列没办法修改的。多谢多谢！  图片1.png |
回复此楼» 猜你喜欢
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有152人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
-
推荐一些基础有机化学的实验教程
已经有0人回复
-
探秘高分子世界：链动微观，筑就材料新篇
已经有0人回复
-
科研赋能时尚宠物：检测护航，焕新养宠体验
已经有0人回复
-
精测粗蛋白：以科研标尺，守品质核心
已经有0人回复
-
解码碳水世界：科研探秘，赋能营养与应用
已经有0人回复
-
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
pcr开始有条带，后来怎样都没条带
已经有8人回复- PCR条带不清晰
已经有20人回复
- pcr目的条带出现杂带，是什么原因？
已经有11人回复
- 基因组无条带，PCR有条带
已经有3人回复
- PCR条带不够亮的原因
已经有22人回复
- 跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现
已经有14人回复
- 提取DNA后，PCR电泳无条带
已经有5人回复
- 求助~~~~~PCR产物条带分析
已经有15人回复
- pcr目的条带暗，怎么办呢？？
已经有25人回复
- PCR扩增不出目的条带
已经有12人回复
- RT—PCR引物、条带问题，新手求助，求意见，求建议！
已经有9人回复
- PCR不出目的条带的原因
已经有12人回复
- 胶回收后再次pcr无目的条带，急，望神人指点。。。
已经有16人回复
- 恐怖的PCR电泳条带。。。。。。。。。。
已经有15人回复
- PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？
已经有9人回复
- PCR一直扩不出目的条带
已经有10人回复
- 自己做的PFU高保真酶PCR，胶图如下，没有目的条带？
已经有17人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- PCR的电泳结果是除了Marker能出来条带，其他都是什么都没有
已经有9人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】pcr反应目的条带很浅，引物二聚体很亮
已经有33人回复
- 【求助/交流】寻求用通用引物进行菌落PCR，无条带的原因
已经有3人回复
- 【求助/交流】PCR没有条带
已经有8人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事?
已经有5人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
guoliwang
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 140 (高中生)
- 金币: 12898.8
- 散金: 45
- 红花: 25
- 帖子: 4962
- 在线: 499.9小时
- 虫号: 3520910
- 注册: 2014-11-05
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
2楼2014-11-18 10:17:29
ksws0465326
金虫 (小有名气)
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 885.4
- 红花: 6
- 帖子: 124
- 在线: 74.5小时
- 虫号: 3263751
- 注册: 2014-06-09
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2014-11-18 14:04:24
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
4楼2014-11-18 18:23:46