24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3098  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转化后提质粒做酶切,可以切出带,做质粒PCR却P不出来,为什么??? 已有10人参与

质粒是PCM351,连接转化后挑菌落提质粒,然后做酶切跑胶,可以很明显的看到切下的条带,大小也正确,但用质粒做PCR后却跑不出条带,,这是什么原因啊,快疯了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
片段很长吗?质粒正反测个序就知道什么情况了。
9楼2014-10-21 12:38:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我就是保哥哥: 金币+2, 有帮助 2014-10-20 15:53:04
我也遇到过相同的情况,可以切出来,但是PCR的时候没有条带···我之所以做PCR,是因为我酶切之后的片段比预想的片段少大概1000bp,所以想用PCR鉴定一下,但没有P出来···个人认为酶切比PCR靠谱···
···
2楼2014-10-20 15:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-20 15:51:42
我也遇到过相同的情况,可以切出来,但是PCR的时候没有条带···我之所以做PCR,是因为我酶切之后的片段比预想的片段少大概1000bp,所以想用PCR鉴定一下,但没有P出来···个人认为酶切比PCR靠谱···

我是转化后挑了16个菌落做菌落PCR,但是P不出来或者非常非常模糊,所以我直接提质粒酶切了,奇怪的是酶切的16个样本都切出来了,就是说我的连接效率是100%,所以这个概率太高了,才做的质粒PCR,结果一个没有P出来。一般来说质粒PCR有结果,酶切没结果是可疑的;但我的酶切有结果,质粒PCR却没结果,这个是为什么呢,我想不通呀,,,压力好大
3楼2014-10-20 15:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢铮

至尊木虫 (著名写手)

爱分子爱实验

请问你用的是什么引物?
博学好友张弛有度
4楼2014-10-20 16:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +34 2261744733 2026-04-11 40/2000 2026-04-13 23:15 by pies112
[基金申请] 有爆料,一个青年教师卖房得400万,然后换了一个四青帽子 +11 babu2015 2026-04-08 11/550 2026-04-13 16:33 by probebill
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 53/2650 2026-04-13 14:20 by 张zhihao
[考研] 化工学硕 285求调剂 +29 Wisjxn 2026-04-07 29/1450 2026-04-13 13:47 by floriea
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 11408。358求调剂 +3 TMYzds 2026-04-07 3/150 2026-04-11 17:10 by 氮气气气
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见