24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1590  |  回复: 3

天湖酒

新虫 (初入文坛)

[求助] 我做质粒扩增诱变pcr 结果正确,但是转化进入感受态不长菌,为何? 已有2人参与

我质粒模板有7Kbp,PCR后电泳条带正确,用Dpn1消化了3小时(也做了对照),直接转化,取100uL涂布,结果对照跟实验组都没有长菌,感受态也没有问题,我转的纯质粒长菌了,我再想线性DNA转化有什么特别要注意的地方吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:37:19
DNA片段转进感受态你觉得能表达么?又不是做基因敲除,好歹连个载体再转。。。
Someone
2楼2014-04-11 12:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:37:26
你不用DpnI处理看看行不行,你用的是什么感受态细胞,这个菌株里面有RecA么?这个要注意的。
另外ia,实在不行的话在体外做次overlap再转进细胞吧。
3楼2014-04-11 13:08:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天湖酒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-11 13:08:22
你不用DpnI处理看看行不行,你用的是什么感受态细胞,这个菌株里面有RecA么?这个要注意的。
另外ia,实在不行的话在体外做次overlap再转进细胞吧。

我就是用的JM109

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-04-12 19:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天湖酒 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工371求调剂 +11 陪琳看海 2026-04-04 12/600 2026-04-05 22:19 by 醉翁wl
[考研] 348求调剂 +3 车厘子zzz 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:30 by 啵啵啵0119
[考研] 材料专硕283求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 15/750 2026-04-05 19:21 by jkddd
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 367求调剂 +3 谢28 2026-03-30 3/150 2026-04-05 13:27 by huangmoli
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 一志愿华中农业大学0710(A)初试329分 求调剂 +4 一名26考研生 2026-04-04 4/200 2026-04-05 10:01 by barlinike
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 化学调剂求助 +6 LULONG1 2026-04-03 6/300 2026-04-03 23:13 by qzxyhcsy
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600,349 +11 吃的不少 2026-03-30 11/550 2026-04-03 18:05 by Jimmyandyou
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 319求调剂 +18 太容易1018 2026-04-01 18/900 2026-04-03 11:18 by linyelide
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 324求调剂 +5 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:16 by sanrepian
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 一志愿大连理工大学,机械工程学硕,341 +3 西瓜田的守望者 2026-03-30 3/150 2026-03-31 11:08 by asdfzly
信息提示
请填处理意见