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[交流]
【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一 已有11人参与
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看各个生物试剂公司的感受态说明书上讲，转化的质粒体积不能超过感受态体积的十分之一，初不明缘由，查阅一番，有云“这样是保证感受态细胞过量”。 既然是想让质粒进入感受太细胞中，为何不是让质粒过量呢？ 小生最近在作酵母双杂交，对于加入的转化质粒的体积是否一如转化大肠杆菌那样？望各位大虾不吝赐教！！！ |
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 分子生物学技术 |
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jhu132llh
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3楼2011-04-11 09:14:05
西瓜
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zhaohq1209
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1949stone(EPI+1): 2011-04-11 12:12:34
西瓜:编辑内容 2011-04-11 14:01
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(EPI+1): 2011-04-11 12:12:34
西瓜:编辑内容 2011-04-11 14:01
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看了楼上几位的，其实个人认为这个转化是看具体情况 1:一般感受态细胞呢，比如10b神马的自己做，转化的时候要看转什么东西进去了，转质粒（含重组的）少量，即2ul入50，60,70ul的感受态细胞均可以，如果是连接产物呢？可以多转化一些。。。5ul 6ul都行。 2：其实合适的比例对于转化效率的高低至关重要，还有就是电转化仪的电压，转化管都是有一定关系的。。 3：回复jhu132llh ：质粒其实要看什么质粒的，不过我觉得不太珍贵吧？几微升转化进大肠杆菌，提质粒可以提取很多的。。。。 4：回复ATP：有试过将多个质粒转化进一个感受态吗？怎么进行验证各种质粒是否已经成功转入呢？如果载体上带有抗性呢？怎么验证？ [ Last edited by 西瓜 on 2011-4-11 at 14:01 ] |
6楼2011-04-11 11:39:09
7楼2011-04-11 12:25:42
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