24小时热门版块排行榜    

查看: 1487  |  回复: 4

screen83

新虫 (初入文坛)

[求助] 转化后不长菌落或不表达!

求助各位高手:
       本人将携带淀粉酶基因的载体通过电转化导入短小芽孢杆菌后,涂布新霉素抗性平板,发现不长菌落,重新制备感受态细胞,长菌落,但是不表达!质粒是放在-80度保存的,没导入大肠杆菌中,会是质粒放置时间长,失效了吗?还是电转设备问题那!请各位虫友帮助想想办法!不胜感激啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windsor2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助,七夕快乐 2012-08-23 15:50:12
首先,能帮你确认质粒放在-80度保存拿出来用是没问题的。其次,你重新制备感受态转化前后这两次,你都要确定你的质粒有没有转进去(和空白作对照或提质粒)。如果转进去了,表达不成功,那你要看看你诱导表达的条件是否合适。望楼主好运
只要功夫深铁杵磨成针
2楼2012-08-23 09:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

screen83

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by windsor2011 at 2012-08-23 09:28:12
首先,能帮你确认质粒放在-80度保存拿出来用是没问题的。其次,你重新制备感受态转化前后这两次,你都要确定你的质粒有没有转进去(和空白作对照或提质粒)。如果转进去了,表达不成功,那你要看看你诱导表达的条件 ...

多谢指教!我再好好琢磨一下!谢谢了!
3楼2012-08-23 09:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windsor2011

银虫 (小有名气)

4楼2012-08-23 10:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰雨@@雾晴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助,七夕快乐 2012-08-23 15:50:27
感觉是你的质粒没有转进去。转化的时候要同一批感受态细胞做对照的,如果对照长了,转了质粒的没长,那就是没转进去;如果两个都没长那就是你的感受态制备的有问题。加油
选中一个目标,坚持不懈的走下去!
5楼2012-08-23 11:39:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 screen83 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见