应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我做质粒扩增诱变pcr 结果正确，但是转化进入感受态不长菌，为何？
51/1返回列表
查看: 1534  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

天湖酒

新虫 (初入文坛)

[求助] 我做质粒扩增诱变pcr 结果正确，但是转化进入感受态不长菌，为何？ 已有2人参与

我质粒模板有7Kbp,PCR后电泳条带正确，用Dpn1消化了3小时（也做了对照），直接转化，取100uL涂布，结果对照跟实验组都没有长菌，感受态也没有问题，我转的纯质粒长菌了，我再想线性DNA转化有什么特别要注意的地方吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-11 11:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天湖酒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-11 13:08:22
你不用DpnI处理看看行不行，你用的是什么感受态细胞，这个菌株里面有RecA么？这个要注意的。
另外ia，实在不行的话在体外做次overlap再转进细胞吧。

我就是用的JM109

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-12 19:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:37:19
DNA片段转进感受态你觉得能表达么？又不是做基因敲除，好歹连个载体再转。。。
赞一下 回复此楼
Someone
2楼2014-04-11 12:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:37:26
你不用DpnI处理看看行不行，你用的是什么感受态细胞，这个菌株里面有RecA么？这个要注意的。
另外ia，实在不行的话在体外做次overlap再转进细胞吧。
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-11 13:08:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭