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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小城大宝

新虫 (初入文坛)

[求助] 克隆菌液涂平板培养12个小时后不长菌,除了感受态的问题,还有哪些原因吗?谢谢 已有1人参与

菌液涂平板培养12个小时后一个菌都不长,除了感受态的问题,还会有哪些原因吗?谢谢指导
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-19 13:36:49
感受态细胞有重要作用外,操作上热激冰浴,板的抗生素是否对,热激完加的LB(不含抗生素),还有就是你的质粒若是连接产物是否连接好,有些质粒可能需要时间长你可以再放放不要超过18h就好。建议你转一个对照看看就可以解决是否是感受态问题,还是质粒问题。
hehe
2楼2012-11-17 11:03:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同时转一下质粒做个正对照,一般用1ng就足够,确定下感受态是不是好用。
3楼2012-11-17 11:53:37
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henryxue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励新虫发帖交流,欢迎道生物医药区 2012-11-17 21:17:29
抗性不要选错,浓度也要相应正确,过高浓度也不行
热激完加LB回复对于kana抗性很重要,但是Amp不影响
平板有问题,比如营养不够或者过高

能想到的就这些
4楼2012-11-17 19:30:49
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fuyin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是你连接的片段浓度低导致连接效率不高哦!
5楼2012-11-17 22:39:56
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taoqi1986918

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

再做一次吧 反正是没长 一个条件一个条件的排除 另外去买商业的感受态 成功率会比较高!加油!!
耐得住寂寞才能拥有繁华!
6楼2013-03-24 19:25:55
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川农一枝花

金虫 (正式写手)

遇到了和你一样的问题 T克隆 寸菌不生。。。
Life is a journey, so enjoy yourself.
7楼2014-05-01 16:38:52
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zaty95

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1、载体和目的片段的重组或连接效率低
2、重组和连接的条件不对,细节没有注意
3.涂板前冷的平板没有恢复室温
越努力,越幸运
8楼2019-09-12 23:50:46
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