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小城大宝

新虫 (初入文坛)

[求助] 克隆菌液涂平板培养12个小时后不长菌，除了感受态的问题，还有哪些原因吗？谢谢已有1人参与

菌液涂平板培养12个小时后一个菌都不长，除了感受态的问题，还会有哪些原因吗？谢谢指导
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1楼2012-11-17 10:34:06
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henryxue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励新虫发帖交流，欢迎道生物医药区 2012-11-17 21:17:29
抗性不要选错，浓度也要相应正确，过高浓度也不行
热激完加LB回复对于kana抗性很重要，但是Amp不影响
平板有问题，比如营养不够或者过高

能想到的就这些
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4楼2012-11-17 19:30:49
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-19 13:36:49
感受态细胞有重要作用外，操作上热激冰浴，板的抗生素是否对，热激完加的LB（不含抗生素），还有就是你的质粒若是连接产物是否连接好，有些质粒可能需要时间长你可以再放放不要超过18h就好。建议你转一个对照看看就可以解决是否是感受态问题，还是质粒问题。
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hehe
2楼2012-11-17 11:03:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同时转一下质粒做个正对照，一般用1ng就足够，确定下感受态是不是好用。
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3楼2012-11-17 11:53:37
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fuyin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你连接的片段浓度低导致连接效率不高哦！
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5楼2012-11-17 22:39:56
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