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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » SaI I酶 酶切，不加保护碱基，一定切不下来吗？
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] SaI I酶 酶切，不加保护碱基，一定切不下来吗？ 已有1人参与

如题，当初设计引物时，师姐说，保护碱基可加可不加，前一段看资料说SaI I酶，不加的话，效率是0，但是我好像切下来了？求指导
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踏实
1楼 2014-10-11 13:17:59
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
你片段是连接到T载体上？
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。
2楼2014-10-11 14:05:05
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2014-10-11 14:05:05
你片段是连接到T载体上？

是的，
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踏实
3楼2014-10-11 14:55:59
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-12 22:37:58
晕，连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。
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学习再学习，努力再努力。
4楼2014-10-11 15:22:02
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 15:22:02
晕，连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。

后续再双酶切，连接到表达载体也没有问题，我不太懂你的意思？
pcr产物才有这一说法
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踏实
5楼2014-10-11 15:56:45
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是的，没有问题的，PCR产物酶切的时候是要加保护碱基的，你都连到质粒上了，保护碱基多的是、、
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学习再学习，努力再努力。
6楼2014-10-11 16:32:27
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 16:32:27
是的，没有问题的，PCR产物酶切的时候是要加保护碱基的，你都连到质粒上了，保护碱基多的是、、

谢谢你，
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踏实
7楼2014-10-11 20:50:06
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852634230

新虫 (初入文坛)
连载体不加保护碱基，没问题的
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今日你对我爱答不理，明天让你高攀不起
8楼2014-10-12 20:20:26
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 852634230 at 2014-10-12 20:20:26
连载体不加保护碱基，没问题的

谢谢，我懂了
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踏实
9楼2014-10-12 21:55:39
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溶溶风儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 15:22:02
晕，连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。

你好，能不能再解释一下，PCR产物才需要保护碱基具体的含义，我不是很理解，谢谢。初入分子生物学，求指点、
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10楼2015-10-30 14:26:52
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