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zgb1982

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[交流] 【求助/交流】SacI酶切位点的保护碱基怎么加，碱基表上的酶切效率只有10%啊已有2人参与

RT，之前设计的酶切位点连T，现在酶切总是切不开，SmaI和SacI,搞不明白是哪里的问题？

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1楼 2010-05-13 12:58:25

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-13 19:43:59

Sac I和Sma I只需要一个保护碱基，你可以设计2个以求保险
http://www.fermentas.com/cn/supp ... cleavage-efficiency

看这个

另外，酶切不开，考虑是不是没纯化干净，以及用的酶是否失活了
现在我买内切酶一般考虑NEB或者Fermentas，日系、国产的一概不考虑，批次不稳定的