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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] SaI I酶 酶切,不加保护碱基,一定切不下来吗?已有1人参与

如题,当初设计引物时,师姐说,保护碱基可加可不加,前一段看资料说SaI I酶,不加的话,效率是0,但是我好像切下来了?求指导
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踏实
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

你片段是连接到T载体上?
2楼2014-10-11 14:05:05
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2014-10-11 14:05:05
你片段是连接到T载体上?

是的,
踏实
3楼2014-10-11 14:55:59
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-10-12 22:37:58
晕,连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。
学习再学习,努力再努力。
4楼2014-10-11 15:22:02
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 15:22:02
晕,连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。

后续再双酶切,连接到表达载体也没有问题,我不太懂你的意思?
pcr产物才有这一说法
踏实
5楼2014-10-11 15:56:45
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是的,没有问题的,PCR产物酶切的时候是要加保护碱基的,你都连到质粒上了,保护碱基多的是、、
学习再学习,努力再努力。
6楼2014-10-11 16:32:27
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 16:32:27
是的,没有问题的,PCR产物酶切的时候是要加保护碱基的,你都连到质粒上了,保护碱基多的是、、

谢谢你,
踏实
7楼2014-10-11 20:50:06
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852634230

新虫 (初入文坛)

连载体不加保护碱基,没问题的
今日你对我爱答不理,明天让你高攀不起
8楼2014-10-12 20:20:26
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 852634230 at 2014-10-12 20:20:26
连载体不加保护碱基,没问题的

谢谢,我懂了
踏实
9楼2014-10-12 21:55:39
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溶溶风儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-11 15:22:02
晕,连接到载体上就不存在保护碱基的事情了。。只有PCR产物才有这一说法。。

你好,能不能再解释一下,PCR产物才需要保护碱基具体的含义,我不是很理解,谢谢。初入分子生物学,求指点、
10楼2015-10-30 14:26:52
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