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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 一个western blot问题不解，求教已有4人参与

假如内参蛋白为GADPH，每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少。为什么看见大家跑出来的GADPH条带与对照组比都是一样粗细？

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1楼 2014-10-08 14:17:22

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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

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【答案】应助回帖

引用回帖:

6楼: Originally posted by j1234555jhh at 2014-10-08 20:27:49
给你举个极限的例子吧，也许能帮助你理解我的意思。
总上样量45μg，对照组目的蛋白有10μg，药物组目的蛋白有40μg。假设剩余的蛋白全是GAPDH，那么对照组GAPDH为35μg，药物组GAPDH为5μg。您还认为这样跑出来的 ...

我知道你的意思，但你多虑了。细胞总蛋白有成千上万种，某种具体蛋白占总蛋白的百分比小的可怜，任何给定蛋白表达多或少，根本不会影响其他蛋白的比率。你就放心吧。