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在川知乐

应助: (幼儿园)
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[交流] 【求助】western blot条带很淡是什么原因已有2人参与

转膜时间1小时20分
1抗bata-actin 1:5000
2抗ribbit 1:20000
曝光时压了5MIN
条带还是很淡
为啥呀？？

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1楼 2010-07-26 17:26:07

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hnw721

铁杆木虫 (著名写手)

PhEPI: 1
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虫号: 868458
注册: 2009-10-11
专业: 中药抗肿瘤药理

隔行如隔山哪，看来我是爱莫能助了！

2楼2010-07-31 11:00:07

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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)

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红花: 1
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注册: 2009-09-03
专业: 肿瘤发生

★
karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-10-17 23:33:01

二抗太低了，actin 的特异性都很好，所以二抗用1：5000，或者1：3000

赞一下(1人)

3楼2010-07-31 11:40:13

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lynni

木虫 (正式写手)

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红花: 1
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在线: 49.9小时
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注册: 2010-09-10
性别: MM
专业: 药理学

我的条带也很浅，信号不强，总是觉得是转膜的问题。

淘喜欢的一切

4楼2010-10-12 22:53:47

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jellyoutman

新虫 (初入文坛)

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专业: 抗肿瘤

可能是抗体稀释倍数太高了，呵呵。

5楼2010-10-13 23:02:08

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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

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注册: 2007-04-05
性别: GG
专业: 抗肿瘤药物药理

二抗可能稀释太多了, 5000或10000就可以了.

除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。

6楼2010-10-14 16:55:59

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xiaoliudalu

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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红花: 1
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在线: 30小时
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注册: 2009-12-03
专业: 抗肿瘤药物药理

我认为是一抗稀释太高了
或是转膜损耗大

7楼2010-10-17 21:46:57

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