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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】western blot条带很淡是什么原因
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在川知乐

[交流] 【求助】western blot条带很淡是什么原因 已有2人参与

转膜时间1小时20分
1抗bata-actin 1:5000
2抗ribbit 1:20000
曝光时压了5MIN
条带还是很淡
为啥呀？？
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1楼 2010-07-26 17:26:07
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hnw721

铁杆木虫 (著名写手)
隔行如隔山哪，看来我是爱莫能助了！
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2楼2010-07-31 11:00:07
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-10-17 23:33:01
二抗太低了，actin 的特异性都很好，所以二抗用1：5000，或者1：3000
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3楼2010-07-31 11:40:13
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lynni

木虫 (正式写手)
我的条带也很浅，信号不强，总是觉得是转膜的问题。
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淘喜欢的一切
4楼2010-10-12 22:53:47
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jellyoutman

新虫 (初入文坛)
可能是抗体稀释倍数太高了，呵呵。
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5楼2010-10-13 23:02:08
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
二抗可能稀释太多了, 5000或10000就可以了.
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
6楼2010-10-14 16:55:59
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xiaoliudalu

铜虫 (小有名气)
我认为是一抗稀释太高了
或是转膜损耗大
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7楼2010-10-17 21:46:57
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