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在川知乐

[交流] 【求助】western blot条带很淡是什么原因 已有2人参与

转膜时间1小时20分
1抗bata-actin 1:5000
2抗ribbit 1:20000
曝光时压了5MIN
条带还是很淡
为啥呀??
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hnw721

铁杆木虫 (著名写手)

隔行如隔山哪,看来我是爱莫能助了!
2楼2010-07-31 11:00:07
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)

★
karl2100(金币+1):谢谢回帖! 2010-10-17 23:33:01
二抗太低了,actin 的特异性都很好,所以二抗用1:5000,或者1:3000
3楼2010-07-31 11:40:13
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lynni

木虫 (正式写手)

我的条带也很浅,信号不强,总是觉得是转膜的问题。
淘喜欢的一切
4楼2010-10-12 22:53:47
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jellyoutman

新虫 (初入文坛)

可能是抗体稀释倍数太高了,呵呵。
5楼2010-10-13 23:02:08
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

二抗可能稀释太多了, 5000或10000就可以了.
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
6楼2010-10-14 16:55:59
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xiaoliudalu

铜虫 (小有名气)

我认为是一抗稀释太高了
或是转膜损耗大
7楼2010-10-17 21:46:57
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