应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 一个western blot问题不解，求教
101/1返回列表
查看: 1731  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

[求助] 一个western blot问题不解，求教 已有4人参与

假如内参蛋白为GADPH，每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少。为什么看见大家跑出来的GADPH条带与对照组比都是一样粗细？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-08 14:17:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-08 23:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个逻辑有点……，你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧？
赞一下 回复此楼
人生中的悲剧太多了
3楼2014-10-09 08:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-10-09 08:18:42
这个逻辑有点……，你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧？

你想表达的是GAPDH的量很大，其它蛋白即使有上调或者下调对GAPDH条带的影响可以忽略吗？
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-09 09:17:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-08 23:20:08
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？

上样量是45μg，目的蛋白多，是不是表示其它蛋白含量就少？
目的蛋白有5μg，其它蛋白量就是40μg。目的蛋白有10μg，其它蛋白量就是35μg。GAPDH包含在其他蛋白里，它的量是恒定的？
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-09 09:21:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-08 23:20:08
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？

给你举个极限的例子吧，也许能帮助你理解我的意思。
总上样量45μg，对照组目的蛋白有10μg，药物组目的蛋白有40μg。假设剩余的蛋白全是GAPDH，那么对照组GAPDH为35μg，药物组GAPDH为5μg。您还认为这样跑出来的GAPDH的条带还是一样的吗？
赞一下 回复此楼
6楼2014-10-09 09:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by j1234555jhh at 2014-10-08 20:27:49
给你举个极限的例子吧，也许能帮助你理解我的意思。
总上样量45μg，对照组目的蛋白有10μg，药物组目的蛋白有40μg。假设剩余的蛋白全是GAPDH，那么对照组GAPDH为35μg，药物组GAPDH为5μg。您还认为这样跑出来的 ...

我知道你的意思，但你多虑了。细胞总蛋白有成千上万种，某种具体蛋白占总蛋白的百分比小的可怜，任何给定蛋白表达多或少，根本不会影响其他蛋白的比率。你就放心吧。
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-09 09:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-09 09:38:06
我知道你的意思，但你多虑了。细胞总蛋白有成千上万种，某种具体蛋白占总蛋白的百分比小的可怜，任何给定蛋白表达多或少，根本不会影响其他蛋白的比率。你就放心吧。...

谢谢！我的心情总算平复了。
赞一下 回复此楼
8楼2014-10-09 10:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

needle_ld

至尊木虫 (正式写手)

木虫学者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
7楼的解释是对的。
不过，眼见为实，有个感性认识更好。转完膜以后，你用Ponseau S染一下膜，自己就明白了。
赞一下 回复此楼
平等观诸法，悲心救世间。解彼真实性，得佛智慧光。
9楼2014-10-09 10:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淡淡De幸福

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个GADPH不过是个内参，跟你目的蛋白的含量没有关系的啊，不论你目的蛋白含量多少，GADPH的含量是一定的啊
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-22 17:07:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 j1234555jhh 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +14 硕星赴 2026-03-23 14/700 2026-03-25 22:22 by 544594351
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +9 RichLi_ 2026-03-25 9/450 2026-03-25 22:21 by 418490947
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 085602 289分求调剂 +7 WWW西西弗斯 2026-03-24 7/350 2026-03-25 14:28 by 3Strings
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭