| 查看: 1018 | 回复: 4 | |||
[交流]
【求助】虚心向大家求教western blot
|
|||
|
各位大侠好！最近开始做western blot，我是新手，所以有些问题请教下大家： 1、从细胞中提蛋白时细胞数一般要达到多少啊？用6孔板长满细胞够吗？ 2、蛋白上样量一般多少合适呢？还有上样体积？ 3、检测的时候用DAB显色行吗？显色后是直接拍照还是用凝胶成像系统保存结果？ 用ECL怎样保存结果呢？ 新手，所以请各位大侠帮助下我！十分感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
081700，311，求调剂
已经有15人回复
-
一志愿北京化工085600 310分求调剂
已经有18人回复
-
085600材料与化工301分求调剂院校
已经有4人回复
-
材料与化工371求调剂
已经有14人回复
-
336材料与化工085600求调剂
已经有7人回复
-
材料334求调剂
已经有18人回复
-
331求调剂
已经有8人回复
-
332求调剂
已经有17人回复
-
一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂
已经有4人回复
-
材料专硕322
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- 请教western blot 时蛋白稀释液情况
已经有4人回复
- western blot 请教
已经有10人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- western blot时marker问题求助
已经有18人回复
- Western blot中出现的问题-求高手指点
已经有17人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 新手求助western blot
已经有22人回复
- 【求助】western blot 湿转 缓冲液 甲醇作用
已经有8人回复
- 【求助/交流】westernblot
已经有10人回复
- 【求助/交流】western blot 缺带 断带
已经有21人回复
- 【求助/交流】western blot
已经有35人回复
- 【求助/交流】western blot 显影后发现条带中空，求解答。
已经有8人回复
- western blot 半干转膜后，发现条带个别缺失，不知道什么原因，请教各位
已经有1人回复
- 【求助/交流】请教Western blot出现非特异性条带的怎么解决
已经有8人回复
- 【求助/交流】western blot中的怪现象，求解~~~
已经有19人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
物理学 调剂
+1/91
-
西安石油大学新能源学院接收材料类、能源动力类、机械类、计算机类等专业专硕调剂生！
+1/89
-
济南大学前沿交叉科学研究院招收2026级调剂生（化学工程085602）
+1/86
-
材料与化工 专硕调剂
+1/41
-
江西理工大学稀土学院招材料类硕士研究生，稀土光功能材料方向，非诚勿扰
+1/37
-
汕头大学土木与智慧建设工程系调剂信息
+1/35
-
欢迎生物医学工程、药学、生物、冶金、计算机等综合表现优秀同学跨调-上海
+1/31
-
烟台大学精准材料高等研究院26年材料方向研究生招生
+1/8
-
西南科技大学国家重点实验室李老师课题组接收材料、化学和化工类研究生调剂
+1/8
-
【#上海调剂急录#】能接受985联合培养的速来！带你发一区文章！
+1/6
-
欢迎调剂攀枝花学院化学工程专业，资源与环境专业，线上复试
+1/6
-
辽宁地区高校招生
+1/5
-
26
+1/5
-
大湾区大学李军课题组招收生物信息学、人工智能方向博士后
+1/4
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/4
-
差旅首选:第一次出差佛山开住宿餐饮发票实体店电子专用,保姆级教程请收好
+1/4
-
武汉纺织大学全国重点实验室吕永钢教授课题组招收材料、化学、生物相关专业硕士研究生
+1/3
-
武汉纺织大学-国家工程实验室王金凤教授课题组招收研究生，线上面试无笔试
+1/3
-
硕士研究生调剂招生
+1/1
-
林业专硕095400 初试333求调剂
+1/1
2楼2011-01-13 15:17:32
★ ★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
novus(金币+1):谢谢交流！ 2011-01-14 15:38:50
xiajing_acm(金币+2): 2011-04-07 21:12:59
xiajing_acm(金币+2): 2011-04-12 08:25:32
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
novus(金币+1):谢谢交流！ 2011-01-14 15:38:50
xiajing_acm(金币+2): 2011-04-07 21:12:59
xiajing_acm(金币+2): 2011-04-12 08:25:32
|
1 我们当时一般用6cm平皿做，6孔板的细胞数长满应该在100万左右，也可以做。只不过提取出来的蛋白浓度不一样。 2 上样前需要测蛋白浓度，一般用BCA法。然后保证每个泳道的总蛋白量一致，在30~80μg之间。也就是说每个孔加的蛋白溶液体积不一样。但要用PBS补加至每孔上样体积一致。上样体积跟个人技术也有关，新手建议控制在20μl以内，这就要求你蛋白浓度要大一点，所以最初用6cm平皿比较好。 3 显色与你使用的抗体也有关，显色后用凝胶呈现系统拍照，有的还需要做灰度分析。 建议你去碧云天网站上查看WESTERN相关试剂的说明书。 |
3楼2011-01-14 11:39:20
简单回复
gwf24634楼
2011-02-24 09:17
回复
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
yk37825楼
2011-03-26 16:55
回复
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
