应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 一个western blot问题不解，求教
101/1返回列表
查看: 2015  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

[求助] 一个western blot问题不解，求教 已有4人参与

假如内参蛋白为GADPH，每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少。为什么看见大家跑出来的GADPH条带与对照组比都是一样粗细？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-08 14:17:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-08 23:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个逻辑有点……，你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧？
赞一下 回复此楼
人生中的悲剧太多了
3楼2014-10-09 08:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-10-09 08:18:42
这个逻辑有点……，你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧？

你想表达的是GAPDH的量很大，其它蛋白即使有上调或者下调对GAPDH条带的影响可以忽略吗？
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-09 09:17:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-08 23:20:08
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？

上样量是45μg，目的蛋白多，是不是表示其它蛋白含量就少？
目的蛋白有5μg，其它蛋白量就是40μg。目的蛋白有10μg，其它蛋白量就是35μg。GAPDH包含在其他蛋白里，它的量是恒定的？
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-09 09:21:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-08 23:20:08
”每次电泳上样量都是恒定的，如果某一蛋白表达上调的话，势必GADPH就会减少“ （你说的是GAPDH吧？）
这话是从何说起？哪里来的？目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢？

给你举个极限的例子吧，也许能帮助你理解我的意思。
总上样量45μg，对照组目的蛋白有10μg，药物组目的蛋白有40μg。假设剩余的蛋白全是GAPDH，那么对照组GAPDH为35μg，药物组GAPDH为5μg。您还认为这样跑出来的GAPDH的条带还是一样的吗？
赞一下 回复此楼
6楼2014-10-09 09:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by j1234555jhh at 2014-10-08 20:27:49
给你举个极限的例子吧，也许能帮助你理解我的意思。
总上样量45μg，对照组目的蛋白有10μg，药物组目的蛋白有40μg。假设剩余的蛋白全是GAPDH，那么对照组GAPDH为35μg，药物组GAPDH为5μg。您还认为这样跑出来的 ...

我知道你的意思，但你多虑了。细胞总蛋白有成千上万种，某种具体蛋白占总蛋白的百分比小的可怜，任何给定蛋白表达多或少，根本不会影响其他蛋白的比率。你就放心吧。
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-09 09:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-09 09:38:06
我知道你的意思，但你多虑了。细胞总蛋白有成千上万种，某种具体蛋白占总蛋白的百分比小的可怜，任何给定蛋白表达多或少，根本不会影响其他蛋白的比率。你就放心吧。...

谢谢！我的心情总算平复了。
赞一下 回复此楼
8楼2014-10-09 10:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

needle_ld

至尊木虫 (正式写手)

木虫学者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
7楼的解释是对的。
不过，眼见为实，有个感性认识更好。转完膜以后，你用Ponseau S染一下膜，自己就明白了。
赞一下 回复此楼
平等观诸法，悲心救世间。解彼真实性，得佛智慧光。
9楼2014-10-09 10:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淡淡De幸福

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个GADPH不过是个内参，跟你目的蛋白的含量没有关系的啊，不论你目的蛋白含量多少，GADPH的含量是一定的啊
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-22 17:07:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 j1234555jhh 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭