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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

[求助] 一个western blot问题不解,求教 已有4人参与

假如内参蛋白为GADPH,每次电泳上样量都是恒定的,如果某一蛋白表达上调的话,势必GADPH就会减少。为什么看见大家跑出来的GADPH条带与对照组比都是一样粗细?
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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-10-09 08:18:42
这个逻辑有点……,你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧?

你想表达的是GAPDH的量很大,其它蛋白即使有上调或者下调对GAPDH条带的影响可以忽略吗?
4楼2014-10-09 09:17:48
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
”每次电泳上样量都是恒定的,如果某一蛋白表达上调的话,势必GADPH就会减少“ (你说的是GAPDH吧?)
这话是从何说起?哪里来的?目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢?
2楼2014-10-08 23:20:08
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陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个逻辑有点……,你的蛋白总样品里面不会只有GAPDH和目的蛋白吧?
人生中的悲剧太多了
3楼2014-10-09 08:18:42
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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-10-08 23:20:08
”每次电泳上样量都是恒定的,如果某一蛋白表达上调的话,势必GADPH就会减少“ (你说的是GAPDH吧?)
这话是从何说起?哪里来的?目的蛋白的高低怎么会影响GAPDH呢?

上样量是45μg,目的蛋白多,是不是表示其它蛋白含量就少?
目的蛋白有5μg,其它蛋白量就是40μg。目的蛋白有10μg,其它蛋白量就是35μg。GAPDH包含在其他蛋白里,它的量是恒定的?
5楼2014-10-09 09:21:49
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