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yanggoing

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取不出来 已有3人参与

最近新购买了大肠杆菌,里面的质粒怎么也提取不出来。还麻烦高手帮我看看是什么原因所致。加了抗生素能生长,且也没有污染杂菌。提取过程如下,挑取单菌落于1ml LB培养基培养4小时,后转移50ul至25ml LB中过夜培养,菌量也看过,没有问题。用的是天根试剂盒提取,步骤都是按它上面的做,后面检测总是没有条带。请各位高手帮我看看是什么原因,谢谢
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qiahaoo

银虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-11 23:03:58
之前提质粒也提不出后来发现是用试剂盒提的时候裂解不充分,后来就在说明书的基础上适当增加裂解时间就好了

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-10-10 13:20:48
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qiahaoo

银虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by qiahaoo at 2014-10-10 13:20:48
之前提质粒也提不出后来发现是用试剂盒提的时候裂解不充分,后来就在说明书的基础上适当增加裂解时间就好了

说明书是5分钟,我是根据说明书上裂解完全的那个颜色指示来确定的,由半透亮变为透亮蓝色
18楼2014-10-12 12:56:23
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