应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取时加入乙醇dna不沉淀
161/1返回列表
查看: 4256  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

776142

金虫 (正式写手)

[交流] 质粒提取时加入乙醇dna不沉淀

在使用自己合成的DNA提取材料提取DNA的时候，用1M的NaCl进行的洗脱，然后用2倍体积的预冷的无水乙醇对DNA进行沉淀，发现没有沉淀，测混合液的紫外也是DNA仍在溶液中，不知道为什么，希望有懂的同学帮忙回答下
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-06-01 18:55:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 木笑子 at 2013-06-04 10:45:50
加入十分之一体积的3M 醋酸钠 pH5.3，或者糖原，可以提高DNA 回收率。

谢谢  额外加了  可以沉淀下来
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2013-06-06 08:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)
祝福祝福祝福祝福祝福祝福！
回复此楼
2楼2013-06-01 19:25:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
776142: 金币+2 2013-06-01 21:16:07
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-01 21:30:55
加入1M的NaC和2倍体积的预冷的无水乙醇，要颠倒混匀，-20度静止20min，高速离心，就可沉淀DNA
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-01 19:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
776142: 金币+2 2013-06-01 21:16:01
776142: 金币+2 2013-06-02 16:02:31
你用乙醇处理后有离心吗？没离心的话DNA自己沉不下来的哦。一般用12,000转离心10分钟。
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-01 20:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2013-06-01 19:57:46
加入1M的NaC和2倍体积的预冷的无水乙醇，要颠倒混匀，-20度静止20min，高速离心，就可沉淀DNA

这些都做了 还是不行 都在乙醇跟水的混合液中
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-01 21:15:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2013-06-01 20:38:02
你用乙醇处理后有离心吗？没离心的话DNA自己沉不下来的哦。一般用12,000转离心10分钟。

离心了  12000g 10分钟
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-01 21:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxncas-2012

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
776142: 金币+1 2013-06-02 16:02:41
会不会是你的乙醇量不够！
算下来才66%！
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-01 23:02:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lsht

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是乙醇不够。乙醇浓度是100%吗？啥材料，用1M NaCl洗？高盐不是使DNA不宜溶解吗？
赞一下 回复此楼
8楼2013-06-02 09:09:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lsht at 2013-06-02 09:09:35
可能是乙醇不够。乙醇浓度是100%吗？啥材料，用1M NaCl洗？高盐不是使DNA不宜溶解吗？

别的洗不下来  只能用氯化钠
赞一下 回复此楼
9楼2013-06-02 15:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2013-06-01 23:02:58
会不会是你的乙醇量不够！
算下来才66%！

正常可以的    一般都是这么做的
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-02 15:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木笑子

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
776142: 金币+5 2013-06-06 08:07:26
776142: 金币+3 2013-06-06 15:22:29
加入十分之一体积的3M 醋酸钠 pH5.3，或者糖原，可以提高DNA 回收率。
赞一下 回复此楼
11楼2013-06-04 10:45:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiabei6131

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你提取的是什么的DNA
赞一下 回复此楼
12楼2013-06-04 12:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
776142: 金币+5 2013-06-06 08:07:37
溶液中盐太多了，电荷影响了DNA的沉淀，一般只加入1/10的PH5.2的乙酸钠
赞一下 回复此楼
14楼2013-06-04 14:26:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by chlorella409 at 2013-06-04 14:26:10
溶液中盐太多了，电荷影响了DNA的沉淀，一般只加入1/10的PH5.2的乙酸钠

加乙醇就是为了除盐，额外加了乙酸钠，能沉淀下来，谢谢
赞一下 回复此楼
16楼2013-06-06 08:08:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
ndfgxhnyq13楼
2013-06-04 12:51   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 776142 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂 +4 一瓶苯甲酸 2026-03-14 4/200 2026-03-20 20:36 by fen_rao
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生（接收计算机专业调剂） +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭