24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4301  |  回复: 14

解瑶123

银虫 (正式写手)

[求助] 无水乙醇沉淀DNA

用无水乙醇提取DNA有什么技巧?为什么我提了两次,都什么都没有?
我的方法:两倍体积的无水乙醇,加入DNA,-20°C两个小时,离心10分钟,10000转。吸弃上清,适当晾干,加入少量的水溶解。
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:00:18
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:01:37
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:34:12
这个样子看可能楼主你处理到这一步的时候就已经没有DNA了……因为无水乙醇这一步唯一可能出现问题的情况就是被DNA沉淀给吸走了……
楼主你如果抽的是基因组DNA的话,加入无水乙醇混匀之后,应该能看到有絮状的沉淀吧?如果没有,至少离心之后应该有沉淀
4楼2012-11-14 09:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:01:49
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:33:46
解瑶123: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-30 20:44:31
我们一般是用试剂盒提取DNA还是从粪便里提,效果都还好了,乙醇的量应该是够了,-20摄氏度两个小时有必要吗,
may
2楼2012-11-14 08:49:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meldoyren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 09:59:58
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:33:57
理论上这个操作时没有问题的,除非你的样品在预处理的时候就出现了问题,另外可以把转速设为12000g。每个转子的转速和离心力大小不一样的。
3楼2012-11-14 09:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivihao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
解瑶123: 金币+2 2012-11-14 10:02:34
乙醇沉淀之前,有没有用醋酸钠呢》?
5楼2012-11-14 09:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
6楼2012-11-14 09:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

解瑶123

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by meldoyren at 2012-11-14 09:00:25
理论上这个操作时没有问题的,除非你的样品在预处理的时候就出现了问题,另外可以把转速设为12000g。每个转子的转速和离心力大小不一样的。

样品在沉淀前肯定没问题,跑电泳看了,有。
7楼2012-11-14 09:59:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

解瑶123

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-14 09:41:51
这个样子看可能楼主你处理到这一步的时候就已经没有DNA了……因为无水乙醇这一步唯一可能出现问题的情况就是被DNA沉淀给吸走了……
楼主你如果抽的是基因组DNA的话,加入无水乙醇混匀之后,应该能看到有絮状的沉淀 ...

应该是没沉淀完全
8楼2012-11-14 10:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

解瑶123

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by vivihao at 2012-11-14 09:45:25
乙醇沉淀之前,有没有用醋酸钠呢》?

我分析着可能是时间不够长,没用醋酸钠
9楼2012-11-14 10:02:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-14 16:34:26
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 21:39:10
加醋酸钠,-20℃放置30min到1h就可以了,当然时间不适合的话放长一点时间不会有影响。离心12000rpm,15~30min,吸干上清的时候要注意有没有把沉淀吸走,然后用75%乙醇洗一到两次,再晾干,用TE溶解。
你的日子如何,你的力量也必如何!
10楼2012-11-14 11:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 解瑶123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程302分求调剂 +9 zyx上岸! 2026-04-04 9/450 2026-04-05 22:08 by 醉翁wl
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:29 by 啵啵啵0119
[考研] 求调剂,一志愿厦门大学,生物与医药,总分272,本科211 +3 Electron1cc 2026-04-01 4/200 2026-04-05 20:24 by lys0704
[考研] 070300化学求调剂 +17 小黄鸭宝 2026-03-30 17/850 2026-04-05 12:03 by 宁馨哈哈
[考研] 271分求调剂学校 +12 zph158488! 2026-04-02 13/650 2026-04-05 10:13 by lqwchd
[考研] 085602 找调剂 +4 逆时针快乐 2026-04-02 4/200 2026-04-04 19:32 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 359求调剂 +7 hhhhaaaa$ 2026-04-04 7/350 2026-04-04 18:49 by imissbao
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-03-31 4/200 2026-04-04 13:34 by 1753564080
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 材料专业383求调剂 +8 郭阳阳阳成 2026-04-03 8/400 2026-04-04 10:29 by Rednal.
[考研] 0856调剂 +8 曲听筠 2026-03-30 8/400 2026-04-04 08:46 by tianyyysss
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 120+4 Yishengeryi 2026-03-30 6/300 2026-04-02 17:19 by Yishengeryi
[考研] 307分求调剂 +14 (o~o) 2026-03-31 15/750 2026-04-01 20:43 by longlotian
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 254材料与化工求调剂 +3 翰冬林楠 2026-03-30 4/200 2026-03-31 17:53 by yishunmin
信息提示
请填处理意见