应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急求！DNA如何具体纯化？
91/1返回列表
查看: 1701  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 急求！DNA如何具体纯化？ 已有2人参与

我用的CTAB法，开始用量多，新鲜叶片5-6g，用50ml离心管，加15ml氯仿异戊醇进行抽提，重复了两遍。最后用异丙醇沉淀，无水乙醇，70%乙醇洗涤。用200ul 水溶解，感觉没容完，还有气泡。

现在感觉DNA含蛋白太多，260：280在1.8以下。想提纯。不知道如何具体操作？是把DNA溶解后，继续用15ml的氯仿异戊醇按原步骤重复抽提吗？还是其他的。。。。

急求！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-17 08:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
顶下～～

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
2楼2014-07-17 09:01:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
小白求助～

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2014-07-17 09:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingrong978

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yangyang1991: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-18 00:44:41
我的导师教我的做法是：
1.2-25倍100%的酒精冰箱中先预冷，降温后再加入DNA中；
2.低温，冰中反应5min至更长时间；
3.低温，离心；
4.加70%乙醇清洗两遍；
5.加TE溶解DNA.
赞一下 回复此楼
攻读海洋石油降解菌研究
4楼2014-07-17 14:32:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jingrong978 at 2014-07-17 14:32:12
我的导师教我的做法是：
1.2-25倍100%的酒精冰箱中先预冷，降温后再加入DNA中；
2.低温，冰中反应5min至更长时间；
3.低温，离心；
4.加70%乙醇清洗两遍；
5.加TE溶解DNA.

谢谢。第一步是加入到之前提的DNA中（已经用水溶过）吧，然后在低温环境中浸洗、离心？
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-17 17:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingrong978

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yangyang1991 at 2014-07-17 17:35:53
谢谢。第一步是加入到之前提的DNA中（已经用水溶过）吧，然后在低温环境中浸洗、离心？...

先把酒精降下温来再加入提取的DNA中，而且，我们都是用TE溶解DNA,水也是可以的！但是两者有多大差别，我不知道呢！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
攻读海洋石油降解菌研究
6楼2014-07-17 18:50:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
嗯，谢谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
7楼2014-07-18 00:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2014-07-18 01:38:46
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

于翔潜底跃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jingrong978 at 2014-07-17 14:32:12
我的导师教我的做法是：
1.2-25倍100%的酒精冰箱中先预冷，降温后再加入DNA中；
2.低温，冰中反应5min至更长时间；
3.低温，离心；
4.加70%乙醇清洗两遍；
5.加TE溶解DNA.

这个方法能够除去蛋白吗？我提取的DNA跑PCR完全没有条带就连引物2聚体也没有但是阳性对照什么都不缺而且提取完DNA我都检测过了提出了DNA我怀疑是不是残存的一些物质抑制PCR求大神解释一下
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-25 16:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangyang1991 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭