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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于乙醇沉淀纯化DNA的问题
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木木一家人

新虫 (小有名气)

[求助] 关于乙醇沉淀纯化DNA的问题 已有7人参与

小弟最近做了PCR扩增DNA，然后用乙醇沉淀进行提纯。但是我怀疑是乙醇没有挥发干净我就加入了TE，对后续的实验产生影响，在这我想求助各位大神，怎样去除产物中少许乙醇呢？
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1楼 2014-05-22 10:03:48
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
木木一家人: 金币+2 2014-05-22 14:29:21
真空干燥，之后加入水再溶解
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2楼2014-05-22 10:27:12
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木木一家人

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangpeng227 at 2014-05-22 10:27:12
真空干燥，之后加入水再溶解

谢谢您的回答。不过，我的DNA量是少量的，这样真空干燥是不是反而对DNA不利呢？因为可能就看不到DNA
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3楼2014-05-22 10:32:50
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心碎

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
木木一家人: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-22 14:28:58
离心完，把大量乙醇用移液器吸走，少量的放真空干燥箱干燥就可以了，我是这么做的，干燥后可以看得到的，透明的片状物，祝好运！
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实验顺利，其他都是浮云
4楼2014-05-22 13:06:47
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bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
木木一家人: 金币+1, ★有帮助 2014-05-22 14:29:08
45度烘箱，或者吹风机也可以，快速搞定。不用完全干，半透明就可以。又不是100%乙醇，残留点水又没关系。
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5楼2014-05-22 13:52:57
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mehongyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
木木一家人: 金币+1, ★有帮助 2014-05-22 14:29:15
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-22 19:27:22
本人经常做DNA纯化，如果条件允许的话建议你用试剂盒，而且不认为乙醇的沉淀效果最佳，如果不是很多盐离子的话，可换异丙醇来沉淀效果更好，你要太在意你干燥后是否能看见，看不见的DNA也足够你做后续的PCR反应。
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6楼2014-05-22 14:09:18
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木木一家人

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 心碎 at 2014-05-22 13:06:47
离心完，把大量乙醇用移液器吸走，少量的放真空干燥箱干燥就可以了，我是这么做的，干燥后可以看得到的，透明的片状物，祝好运！

谢谢，要完全干燥么
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7楼2014-05-22 14:27:00
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木木一家人

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bioleo at 2014-05-22 13:52:57
45度烘箱，或者吹风机也可以，快速搞定。不用完全干，半透明就可以。又不是100%乙醇，残留点水又没关系。

谢谢，那残留的乙醇会对后续的酶促反应有影响吗
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8楼2014-05-22 14:27:33
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木木一家人

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mehongyu at 2014-05-22 14:09:18
本人经常做DNA纯化，如果条件允许的话建议你用试剂盒，而且不认为乙醇的沉淀效果最佳，如果不是很多盐离子的话，可换异丙醇来沉淀效果更好，你要太在意你干燥后是否能看见，看不见的DNA也足够你做后续的PCR反应。

谢谢。之前我也是用试剂盒回收的，但是回收效率和乙醇沉淀法相比，还是后者比较高。
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9楼2014-05-22 14:28:41
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notebox

新虫 (小有名气)
gyesang: 屏蔽内容, 请认真回答楼主问题，勿灌水！ 2014-05-25 23:00:39
本帖内容被屏蔽
10楼2014-05-22 16:15:14
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