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牵着小牛散步

金虫 (初入文坛)

[求助] 提取DNA,用异丙醇沉淀后,加无菌水DNA不溶,该怎么办 已有6人参与

提取DNA,用异丙醇沉淀后,加无菌水怎么都不溶,可能是酚氯仿异戊醇抽提的不干净,请问有办法回到之前的步骤吗?
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by 牵着小牛散步 at 2014-01-10 17:08:40
后面要PCR,,不溶跑的出来胶吗??...

应该是能跑出来的,吸样品的时候避免吸到不溶物,跑出来的胶图里除了DNA的条带可能还会有些拖尾之类的现象
前方总有更多挑战,战胜恐惧,勇往向前,加油~~~~
10楼2014-01-10 17:19:21
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普通回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

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牵着小牛散步: 金币+1, ★有帮助 2014-01-09 18:30:32
我也遇到过,只能是溶解多少就得到多少了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2014-01-09 18:07:33
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盐师生科院

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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牵着小牛散步: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-01-10 16:50:00
再加苯酚和异戊醇抽提一次,再加70%乙醇洗2次,去除杂质后就好溶解了。
3楼2014-01-09 20:26:40
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

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不溶的都不是DNA,不知道楼主后面要做什么,如果是单纯PCR的话不要紧的,用就行
前方总有更多挑战,战胜恐惧,勇往向前,加油~~~~
4楼2014-01-10 08:17:25
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

如果想纯一些,就再抽提一次,用乙醇洗
前方总有更多挑战,战胜恐惧,勇往向前,加油~~~~
5楼2014-01-10 08:18:12
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樊华易逝

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
???质多了???????以????一下?????步骤。

[ ????С??????? ]
6楼2014-01-10 08:31:41
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loveerobin

木虫 (职业作家)

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★
感谢参与,应助指数 +1
牵着小牛散步: 金币+1, ★有帮助 2014-01-10 17:09:46
用氯仿再抽提一次,乙醇洗两次,重新溶解
7楼2014-01-10 09:22:23
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wairi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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牵着小牛散步: 金币+1, ★有帮助 2014-01-10 17:09:54
酚仿再次抽提,乙醇洗涤,然后用TE溶。
8楼2014-01-10 11:20:02
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牵着小牛散步

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bikexmx at 2014-01-10 08:17:25
不溶的都不是DNA,不知道楼主后面要做什么,如果是单纯PCR的话不要紧的,用就行

后面要PCR,,不溶跑的出来胶吗??
Fighting!
9楼2014-01-10 17:08:40
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